| 携带TGEV DNA疫苗减毒沙门氏菌的构建及安全性与免疫性分析 |
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| 引用本文： | 杨恒,刘佳文,曹三杰,黄小波,文心田.携带TGEV DNA疫苗减毒沙门氏菌的构建及安全性与免疫性分析[J].微生物学报,2009,49(1):72-77. |
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| 作者姓名： | 杨恒 刘佳文 曹三杰 黄小波 文心田 |
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| 作者单位： | 四川农业大学动物医学院,动物传染病与基因芯片实验室,四川省动物疫病与人类健康重点实验室,雅安,625014 |
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| 基金项目： | 教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目（IRT0555-9）；四川省教育厅资助科研项目 |
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| 摘 要： | 【目的】探讨以减毒沙门氏菌为载体，进行TGEV DNA疫苗口服免疫可行性。【方法】通过RT-PCR扩增TGEV四川株（SC-H）S基因5’端约2.1 kb的主要抗原位点片段，将其插入真核表达载体pVAX1，构建重组质粒pVAX-S，体外转染COS7细胞，间接免疫荧光检测S基因表达。通过电转化将pVAX-S转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207，构建SL7207（pVAX-S）重组菌，并在体外感染小鼠腹腔巨噬细胞，以RT-PCR、间接免疫荧光检测细胞内S基因的转录与表达情况。将SL7207（pVAX-S）重组菌以5×108、1×109、2×109CFU剂量口服接种BALB/c小鼠，分析其安全性，并以1×109CFU剂量的重组菌3次免疫BALB/c小鼠，通过间接ELISA检测免疫小鼠的血清IgG与肠道粘膜IgA抗体。【结果】成功构建重组质粒pVAX-S，且重组质粒能在COS7细胞中表达。重组菌SL7207（pVAX-S）感染巨噬细胞后检测到目的基因的转录、表达。小鼠口服接种不同剂量重组菌，具有良好的安全性。免疫小鼠于二免后两周可检测到针对TGEV S蛋白的特异性血清IgG与肠道粘膜IgA抗体，且三免后两周与SL7207（pVAX1）空载体免疫组间分别存在显著性差异（P<0.05）和极显著性差异（P<0.01）。【结论】携带TGEV DNA疫苗的减毒沙门氏菌小鼠试验显示了良好的免疫原性与安全性。
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| 关 键 词： | 猪传染性胃肠炎病毒 S基因 减毒沙门氏菌 DNA疫苗 安全性 免疫原性 |
| 收稿时间： | 8/6/2008 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 2008/10/15 0:00:00 |
Construction and safety,immunogenicity analysis of attenuated Salmonella typhimurium harbouring TGEV DNA vaccine |
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| Heng Yang,Jiawen Liu,Sanjie Cao,Xiaobo Huang and Xin-tian Wen.Construction and safety,immunogenicity analysis of attenuated Salmonella typhimurium harbouring TGEV DNA vaccine[J].Acta Microbiologica Sinica,2009,49(1):72-77. |
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| Authors: | Heng Yang Jiawen Liu Sanjie Cao Xiaobo Huang and Xin-tian Wen |
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| Keywords: | Transmissible gastroenteritis virus S gene attenuated Salmonella DNA vaccine safety immunogenicity |
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