| 肠炎沙门菌肽脯氨酰顺反异构酶SlyD的基因敲除、表达及酶学特征 |
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| 引用本文： | 郭荣显,朱姗姗,焦扬,安树敏,薛颖,费晓,耿士忠,潘志明,焦新安.肠炎沙门菌肽脯氨酰顺反异构酶SlyD的基因敲除、表达及酶学特征[J].微生物学报,2016,56(8):1282-1290. |
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| 作者姓名： | 郭荣显 朱姗姗 焦扬 安树敏 薛颖 费晓 耿士忠 潘志明 焦新安 |
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| 作者单位： | 扬州大学, 江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009,扬州大学, 江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009,扬州大学, 江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009,扬州大学, 江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009,扬州大学, 江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009,扬州大学, 江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009,扬州大学, 江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009,扬州大学, 江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009,扬州大学, 江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点国际合作项目（31320103907）；国家公益性行业（农业）科研专项（201403054）；江苏省优势学科经费资助；江苏省研究生培养创新工程项目（KYLX15_1384） |
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| 摘 要： | 【目的】以肠炎沙门菌肽脯氨酰顺反异构酶SlyD为对象,构建基因缺失株及表达纯化该蛋白,为研究其在肠炎沙门菌致病性与应激等方面的作用奠定基础。【方法】参考Gen Bank登录的肠炎沙门菌基因组序列设计用于slyD基因敲除及原核表达的特异引物,运用自杀质粒介导的同源重组技术对肠炎沙门菌C50041 slyD基因进行敲除,构建C50041ΔslyD缺失株;原核表达SlyD蛋白,通过α-糜蛋白酶耦联法对其PPIase活性进行测定;利用生物信息学相关软件,分析SlyD蛋白的氨基酸序列及功能域。【结果】PCR鉴定与测序结果证明成功构建了肠炎沙门菌C50041ΔslyD缺失株,其生长特性与野生株基本一致;SDS-PAGE及PPIase活性分析表明,获得了具有生物活性的可溶性SlyD蛋白;生物信息学分析显示SlyD蛋白由FKBP样肽脯氨酰顺反异构酶结构域、分子伴侣功能域和金属结合区域3个功能区域组成。【结论】成功获得了肠炎沙门菌C50041ΔslyD缺失株和具有PPIase活性的重组SlyD蛋白。
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| 关 键 词： | 肠炎沙门菌 SlyD蛋白 基因敲除 肽脯氨酰顺反异构酶 |
| 收稿时间： | 2015/11/3 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2016/1/10 0:00:00 |
Deletion-mutant construction, prokaryotic expression and characterization of peptidal-prolyl cis-trans isomerase SlyD from Salmonella enteritidis |
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| Rongxian Guo,Shanshan Zhu,Yang Jiao,Shumin An,Ying Xue,Xiao Fei,Shizhong Geng,Zhiming Pan and Xinan Jiao.Deletion-mutant construction, prokaryotic expression and characterization of peptidal-prolyl cis-trans isomerase SlyD from Salmonella enteritidis[J].Acta Microbiologica Sinica,2016,56(8):1282-1290. |
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| Authors: | Rongxian Guo Shanshan Zhu Yang Jiao Shumin An Ying Xue Xiao Fei Shizhong Geng Zhiming Pan and Xinan Jiao |
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| Institution: | Key Laboratory of Zoonoses of Jiangsu Province, Co-Innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses of Jiangsu Province, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu Province, China,Key Laboratory of Zoonoses of Jiangsu Province, Co-Innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses of Jiangsu Province, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu Province, China,Key Laboratory of Zoonoses of Jiangsu Province, Co-Innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses of Jiangsu Province, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu Province, China,Key Laboratory of Zoonoses of Jiangsu Province, Co-Innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses of Jiangsu Province, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu Province, China,Key Laboratory of Zoonoses of Jiangsu Province, Co-Innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses of Jiangsu Province, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu Province, China,Key Laboratory of Zoonoses of Jiangsu Province, Co-Innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses of Jiangsu Province, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu Province, China,Key Laboratory of Zoonoses of Jiangsu Province, Co-Innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses of Jiangsu Province, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu Province, China,Key Laboratory of Zoonoses of Jiangsu Province, Co-Innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses of Jiangsu Province, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu Province, China and Key Laboratory of Zoonoses of Jiangsu Province, Co-Innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses of Jiangsu Province, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu Province, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Salmonella enteritidis SlyD gene knock-out peptidal-prolyl cis-trans isomerase |
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