| 禽致病性大肠杆菌毒力基因多重PCR方法的建立和应用 |
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| 引用本文： | 孟庆美,王少辉,韩先干,韩月,丁铲,戴建君,于圣青.禽致病性大肠杆菌毒力基因多重PCR方法的建立和应用[J].微生物学报,2014,54(6):696-702. |
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| 作者姓名： | 孟庆美 王少辉 韩先干 韩月 丁铲 戴建君 于圣青 |
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| 作者单位： | 南京农业大学动物医学院，江苏南京210095;中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241;中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241;中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241;中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241;南京农业大学动物医学院，江苏南京210095;中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81201266，31370045，31072161);公益性行业(农业)专项:家禽主要细菌病防控技术研究与示范(201303044) |
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| 摘 要： | 【目的】建立禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)黏附相关基因、侵袭及毒素相关基因、抗血清存活相关基因及铁转运相关基因的多重PCR方法,实现禽致病性大肠杆菌毒力基因的简便、快速检测。【方法】根据GenBank公布的基因序列,设计合成18对特异性引物,通过条件优化,建立四组多重PCR体系,并通过模板倍比稀释检测各组多重PCR的灵敏性。利用多重PCR检测100株APEC毒力基因的分布,验证多重PCR方法的可行性。【结果】根据PCR扩增片段大小判定,上述四组多重PCR体系均能同时扩增出该组中的各个毒力基因,且灵敏度分别为:103CFU、103CFU、105CFU、105CFU细菌和1ng、1ng、10ng、10ng DNA。100株APEC的毒力因子检测结果显示,多重PCR和单基因PCR结果一致。【结论】建立的四组多重PCR方法能够简便、快速地检测禽致病性大肠杆菌的毒力基因,可用于毒力基因的鉴定以及流行病学调查。
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| 关 键 词： | 禽致病性大肠杆菌 毒力基因 多重PCR 检测 |
| 收稿时间： | 2013/9/18 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2013/12/18 0:00:00 |
Multiplex PCR assay for detection of virulence genes in Avian pathogenic Escherichia coli |
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| Qingmei Meng,Shaohui Wang,Xiangan Han,Yue Han,Chan Ding,Jianjun Dai and Shengqing Yu.Multiplex PCR assay for detection of virulence genes in Avian pathogenic Escherichia coli[J].Acta Microbiologica Sinica,2014,54(6):696-702. |
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| Authors: | Qingmei Meng Shaohui Wang Xiangan Han Yue Han Chan Ding Jianjun Dai and Shengqing Yu |
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