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Hendra病毒一步法Real-time RT-PCR检测方法的建立
引用本文:曾志磊,谢鹏,朱丹,刘妍汐,翟红,彭丹,陈晓.Hendra病毒一步法Real-time RT-PCR检测方法的建立[J].中国微生态学杂志,2009,21(5).
作者姓名:曾志磊  谢鹏  朱丹  刘妍汐  翟红  彭丹  陈晓
作者单位:1. 重庆医科大学附属第一医院,神经内科,重庆,400016;重庆医科大学基础研究所,重庆,400016
2. 重庆医科大学附属第一医院,神经内科,重庆,400016;重庆医科大学基础研究所,重庆,400016;感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆,400016
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划) 
摘    要:目的 建立针对Hendra病毒N基因的一步法Real-time RT-PCR检测方法,用于Hendra病毒感染样本的快速检测和准确定量.方法 针对Hendra病毒的保守基因N设计引物和探针,构建体外转录的RNA片段作为标准品,建立一步法Real-time RT-PCR反应方法并分析敏感性和特异性.结果 所设计的引物经Blast检索可以用于检测所有已知的Hendra病毒株.本研究建立的一步法Real-time RT-PCR方法可以特异性检测出Hendra病毒,不与Nipah病毒产生交叉反应.检测灵敏度为2.6×100~2.6×101copies/μl.标准曲线的线性范围为2.6×101~2.6×107copies/μl.结论 本研究建立的一步法Real-time RT-PCR方法敏感性和特异性较高,且不易出现污染引起的假阳性结果,适合用于Hendra病毒感染样本的检测.

关 键 词:Hendra病毒  一步法  Taqman探针  快速检测

Development of one step Real-time RT-PCR method for detection of Hendra virus
ZENG Zhi-lei,XIE Peng,ZHU Dan,LIU Yan-xi,ZHAI Hong,PENG Dan,CHEN Xiao.Development of one step Real-time RT-PCR method for detection of Hendra virus[J].Chinese Journal of Microecology,2009,21(5).
Authors:ZENG Zhi-lei  XIE Peng  ZHU Dan  LIU Yan-xi  ZHAI Hong  PENG Dan  CHEN Xiao
Abstract:
Keywords:Real-time RT-PCR
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