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香菇菌C91-3凋亡相关蛋白24414在毕赤酵母GS115中的表达与鉴定
引用本文:刘奔,钟民涛,王晓丽,孙文长,李星云,刘磊,宁安红,黄敏.香菇菌C91-3凋亡相关蛋白24414在毕赤酵母GS115中的表达与鉴定[J].中国微生态学杂志,2012,24(2):126-131.
作者姓名:刘奔  钟民涛  王晓丽  孙文长  李星云  刘磊  宁安红  黄敏
作者单位:大连医科大学微生物学教研室,辽宁大连,116044
摘    要:目的通过构建毕赤酵母表达载体将香菇菌C91-3凋亡相关蛋白24414在毕赤酵母GS115中进行表达,同时对表达产物进行鉴定。方法从香菇菌C91-3菌丝体中提取总RNA,根据转录组测序结果,用3'-Full RACE、5'-Full RACE方法获得24414基因,并将其克隆到毕赤酵母的表达载体pPIC9K中,构建真核重组表达质粒pPIC9K-24414。用电转化的方法将此质粒转化到毕赤酵母GS115中并进行诱导表达,对表达产物用Westen-blot方法进行鉴定。结果通过菌落PCR和基因序列分析确定插入pPIC9K中的片段为24414基因片段,通过Westen-blot方法确定所表达蛋白为目的蛋白。结论重组质粒pPIC9K-24414成功构建,目的凋亡相关蛋白24414在毕赤酵母GS115中成功表达,为进一步研究香菇菌C91-3凋亡相关蛋白24414的生物学功能奠定了基础。

关 键 词:香菇菌  凋亡  蛋白  毕赤酵母  表达

Expression and characterization of Lentinus edodes C91-3 apoptosis protein 24414 in Pichia pastoris GS115
LIU Ben , ZHONG Min-tao , WANG Xiao-li , SUN Wen-chang , LI Xing-yun , LIU Lei , NING An-hong , HUANG Min.Expression and characterization of Lentinus edodes C91-3 apoptosis protein 24414 in Pichia pastoris GS115[J].Chinese Journal of Microecology,2012,24(2):126-131.
Authors:LIU Ben  ZHONG Min-tao  WANG Xiao-li  SUN Wen-chang  LI Xing-yun  LIU Lei  NING An-hong  HUANG Min
Institution:(Department of Microbiology,Dalian Medical University,Dalian 116044,China)
Abstract:
Keywords:Lentinus edodes  Apoptosis  Protein  Pichia pastoris  Expression
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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