| 幽门螺杆菌重组vacA-CtxB蛋白的原核表达及免疫学研究 |
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| 引用本文： | 张任飞,杨致邦,马永能,潘淑,张婧.幽门螺杆菌重组vacA-CtxB蛋白的原核表达及免疫学研究[J].中国微生态学杂志,2015(11). |
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| 作者姓名： | 张任飞 杨致邦 马永能 潘淑 张婧 |
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| 作者单位： | 绵阳市第三人民医院 检验科,重庆医科大学 基础医学院病原生物学教研室,绵阳市第三人民医院 检验科,绵阳市第三人民医院 检验科,绵阳市第三人民医院 检验科 |
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| 摘 要： | 目的原核表达幽门螺杆菌pQE-vctB(含H.pylori细胞空泡毒素毒性片段与霍乱毒素B亚单位的融合基因)在E.coil DH5α中诱导表达,以获得重组蛋白,鉴定其抗原性和免疫原性,为制备防治H.pylori感染的口服疫苗奠定基础。方法 (1)pQE-vctB转化E.coli DH5α,IPTG诱导表达重组蛋白VCTB,Western blot分析抗原性,镍离子柱纯化。(2)重组蛋白VCTB口服免疫小鼠,ELISA检测小鼠血清特异性IgG、小肠冲洗液IgA,以鉴定其免疫原性。结果重组蛋白VCTB经SDS-PAGE分析相对分子量(Mr)约为40kD,亲和层析后可获得纯度为92%以上的蛋白。Western blot分析显示能与VacA抗血清反应。ELISA检测显示,免疫小鼠的血清特异性抗体IgG,肠粘液IgA显著高于VacA对照组(P0.01)。结论 vacA和ctxB融合基因原核表达质粒转化E.coli DH5α表达菌获得了重组蛋白VCTB,表达量较高,纯度较高,有良好的抗原性和免疫原性,口服免疫小鼠可明显提高其免疫效果,产生较高水平的IgA,可用于制备防治H.pylori感染的口服疫苗。
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 细胞空泡毒素 霍乱毒素B亚单位 原核表达 口服疫苗 |
Prokaryotic expression and immunological study of
recombinant vacA-CtxB fusion protein of Helicobacter pylori |
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