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建立PCR-CE-RFLP方法快速诊断女性生殖道的细菌感染
引用本文:李琳,张卓然,李坤,韩英,王敏杰,潘峰.建立PCR-CE-RFLP方法快速诊断女性生殖道的细菌感染[J].中国微生态学杂志,2006,18(1):49-52.
作者姓名:李琳  张卓然  李坤  韩英  王敏杰  潘峰
作者单位:1. 大连市妇产医院,辽宁,大连,116021
2. 大连医科大学,辽宁,大连,116027
3. 大连大学医学院,辽宁,大连,116022
摘    要:目的建立PCR-CE-RFLP方法直接检测女性生殖道感染标本中的细菌,为临床提供快速、准确的诊断依据。方法利用细菌16SrRNA集保守性和变异性于一体的特点,合成1对通用引物,其上游5’端用5'-FAM标记。将8株已知菌和38例临床诊断为生殖道炎症的标本及其培养物进行PCR扩增,扩增产物经限制性内切酶HaeⅢ消化,经毛细管电泳(CE)通过限制性片断长度多态性分析(RFLP)来鉴定不同病原菌。结果(1)已知菌株PCR扩增阳性率为75%(6/8)、生殖道感染标本的PCR扩增阳性率为79%(30/38),毛细管电泳阳性率两者均为100%。(2)已知菌株PER扩增产物的5’端HaeⅢ完全酶切片段的毛细管电泳结果,与电子克隆产物的酶切片段基本一致。(3)用传统培养检测法在生殖道能检出的常见致病菌,实验用PCR-CE-RFLP法同样也能检出。(4)实验还发现数种传统培养法未检出的细菌。结论PCR-CE-RFLP法比传统的细菌培养法具有快速、准确、灵敏的优点,比传统方法缩短20h,可用于临床标本的直接鉴定。

关 键 词:PCR-毛细管电泳-限制性片断长度多态性  原始标本
文章编号:1005-376X(2006)01-0049-04
收稿时间:2005-09-20
修稿时间:2005年9月20日

Study of rapid identification of pathogenic bacteria on feminine genital tract by PCR-CE-RFLP
LI Lin,ZHANG Zhuo-ran,LI Kun,HAN Ying,WANG Min-jie,PAN Feng.Study of rapid identification of pathogenic bacteria on feminine genital tract by PCR-CE-RFLP[J].Chinese Journal of Microecology,2006,18(1):49-52.
Authors:LI Lin  ZHANG Zhuo-ran  LI Kun  HAN Ying  WANG Min-jie  PAN Feng
Institution:The Gynaecology and Obstetrics Hospital of Dalian, Dalian 116021, China
Abstract:
Keywords:16S rRNA
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