| 不同保存和处理方式对全血标本总RNA提取的影响 |
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| 引用本文： | 何松哲,何慧,陈懿,陈羽,余道军.不同保存和处理方式对全血标本总RNA提取的影响[J].中国微生态学杂志,2015(2):223-226. |
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| 作者姓名： | 何松哲 何慧 陈懿 陈羽 余道军 |
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| 作者单位： | 浙江中医药大学附属杭州第一医院;杭州市第一人民医院;温州医科大学 |
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| 基金项目： | 杭州市科技局社会发展科研计划资助项目(20130733Q04);杭州市卫生科技计划重大项目(2012ZD001) |
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| 摘 要： | 目的分析全血标本RNA提取的影响因素,并对全血RNA提取条件进行优化。方法收集100例全血标本,混匀后分为低渗红细胞溶解组(A组,50例)和全血直接提取组(B组,50例),利用Trizol试剂提取放置在不同温度、不同保存时间的全血标本总RNA,并采用Ur-2401紫外分光光度计测定其浓度和纯度;另选60例全血标本作为反复冻融组(C组),取不同次数反复冻融的全血标本利用Trizol法直接提取其RNA。结果 A组和B组新鲜标本中所获取的RNA浓度分别为450.0 ng/μL和458.8 ng/μL,37℃保存7 d标本中的RNA浓度分别为374.8 ng/μL和375.2 ng/μL,不同的保存温度与时间均对总RNA浓度(P=0.003、P=0.002)和纯度(P值均为0.011)的差异均有统计学意义,而相同条件下提取的总RNA浓度和纯度的差异无统计学意义(P=0.984、P=0.311);C组全血标本反复冻融的次数与保存时间对总RNA浓度(P=0.002、P=0.001)、纯度(P值均为0.008)差异均有统计学意义,而保存温度对总RNA浓度和纯度差异无统计学意义(P=0.611、P=0.362)。结论不同条件下全血标本中所获取的总RNA浓度有所差异,但在总RNA纯度和成功率方面,低渗破坏红细胞法优于直接全血提取法,反复冻融影响全血RNA提取效率和得率。
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| 关 键 词： | 外周全血 RNA提取 RNA浓度 RNA纯度 |
Effects of different preservation condition and processing methods on
RNA isolation from whole blood |
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| HE Song-zhe;HE Hui;CHEN Yi;CHEN Yu;YU Dao-jun.Effects of different preservation condition and processing methods on
RNA isolation from whole blood[J].Chinese Journal of Microecology,2015(2):223-226. |
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| Authors: | HE Song-zhe;HE Hui;CHEN Yi;CHEN Yu;YU Dao-jun |
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| Institution: | HE Song-zhe;HE Hui;CHEN Yi;CHEN Yu;YU Dao-jun;The First Affiliated Hospital of Hangzhou,Zhejiang Chinese Medical University;The First People’s Hospital of Hangzhou;Wenzhou Medical University; |
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