| 米曲霉FleA基因的原核表达及纯化 |
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| 引用本文： | 孙钰涵,李志,王萌萌,李明,李文哲.米曲霉FleA基因的原核表达及纯化[J].中国微生态学杂志,2021,33(9):1005-1008. |
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| 作者姓名： | 孙钰涵 李志 王萌萌 李明 李文哲 |
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| 作者单位： | 大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,辽宁 大连 116044;大连市中心医院检验科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31870797,31570797)；广州市合生元营养与护理研究院母婴营养与护理研究基金(2018BINCMCF39) |
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| 摘 要： | 目的研究米曲霉FleA基因克隆菌株的构建及米曲霉凝集素(Aspergillus oryzae lectin, AOL)蛋白表达。方法培养米曲霉RIB40,TRIzol法提取米曲霉RNA,用反转录试剂盒合成FleA全基因,设计引物扩增FleA基因,并将此片段与PJET克隆质粒连接构建克隆菌株,经双酶切筛选出阳性克隆菌株送去测序,将序列正确的克隆菌与表达载体pET-28a(+)分别经过双酶切后连接,转化到宿主菌E.coil BL21,IPTG诱导AOL目的蛋白表达,SDS-PAGE检测分析。结果 PCR成功扩增获得FleA基因,大小约950 bp,成功连接至PJET克隆载体后,经双酶切回收后又与pET-28a(+)成功连接,经过IPTG诱导后SDS-PAGE检测结果显示目的基因成功表达。结论该研究成功构建了米曲霉FleA基因,获得了表达蛋白,为今后结构和功能研究奠定了一定的基础。
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| 关 键 词： | 米曲霉凝集素 FleA基因 原核表达 |
Prokaryotic expression and purification of FleA of Aspergillus oryzae |
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| SUN Yu han,LI Zhi,WANG Meng meng,LI Ming,LI Wen zhe.Prokaryotic expression and purification of FleA of Aspergillus oryzae[J].Chinese Journal of Microecology,2021,33(9):1005-1008. |
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| Authors: | SUN Yu han LI Zhi WANG Meng meng LI Ming LI Wen zhe |
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| Institution: | College of Basic Medical Science, Dalian Medical University, Dalian, Liaoning 116044, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Aspergillus oryzae lectin FleA gene Prokaryotic expression |
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