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猪骨骼肌MyHC-Ⅱb基因上调表达的分子机制
引用本文:张琪,杜胭脂,王鹏飞,李艳平,王力圆,李毅,孙亿,姜运良.猪骨骼肌MyHC-Ⅱb基因上调表达的分子机制[J].中国科学:生命科学,2015,45(1):35-42.
作者姓名:张琪  杜胭脂  王鹏飞  李艳平  王力圆  李毅  孙亿  姜运良
作者单位:山东农业大学动物科技学院&动物医学院, 泰安 271018
基金项目:转基因生物新品种培育科技重大专项(批准号: 2011ZX08009-004)、山东省农业良种工程(2013)和山东省科技发展计划(批准号: 2012GXG11308)资助项目
摘    要:哺乳动物骨骼肌由各种不同类型的肌纤维镶嵌而成,不同类型肌球蛋白重链的表达是造成不同类型肌纤维的主要原因.目前已知的肌球蛋白重链家族包含8种亚型,其中长白猪骨骼肌My HC-Ⅱb的表达量显著高于中国地方猪,然而造成这种差异的分子机制未见报道.本研究用荧光定量PCR证明了长白猪背最长肌中My HC-Ⅱb m RNA的表达量显著高于莱芜猪(P=0.013).删除实验结果表明,从转录起始位点上游-1024 bp删除到-187 bp之后,My HC-Ⅱb表达量显著下降,分析发现,在这段启动子区域内存在3个E-box序列;分别突变这3个E-box序列后,My HC-Ⅱb启动子驱动的荧光素酶活性显著下降(P=0.036).另外,在My HC-Ⅱb上游启动子区?1398 bp处发现一个GT的突变,所检测的64头莱芜猪在该位点全部为GG型,65头长白猪中13头为GG型,16头为TT型,36头为GT型.在C2C12细胞系中的转染实验结果显示,G突变为T之后有增加My HC-Ⅱb表达的趋势.Western blot的结果表明,转录因子Myo D在两猪种间表达差异不显著(P=0.136),而Myf-5在长白猪中的表达量极显著高于其在莱芜猪中的表达量(P=0.0036).这些数据表明,Myf-5是造成猪My HC-Ⅱb基因m RNA上调表达的重要因素之一.

关 键 词:  MyHC-Ⅱb  上调  启动子  Myf-5

Molecular Mechanism of Up-Regulating the Expression of Porcine Myhc-IIb Gene in Skeletal Muscle
ZHANG Qi,DU YanZhi,WANG PengFei,LI YanPing,WANG LiYuan,LI Yi,SUN Yi,JIANG YunLiang.Molecular Mechanism of Up-Regulating the Expression of Porcine Myhc-IIb Gene in Skeletal Muscle[J].Scientia Sinica Vitae,2015,45(1):35-42.
Authors:ZHANG Qi  DU YanZhi  WANG PengFei  LI YanPing  WANG LiYuan  LI Yi  SUN Yi  JIANG YunLiang
Institution:College of Animal Science and Veterinary Medicine, Shandong Agricultural University, Tai''an 271018, China
Abstract:
Keywords:pig  MyHC-IIb  up-regulation  promoter  Myf-5
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