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Magainin和cecA-mil抗菌肽基因的密码子优化及在毕赤酵母中的高效表达
引用本文:张素芳,贾赟,蔡梅红,仇妍虹,陈溥言.Magainin和cecA-mil抗菌肽基因的密码子优化及在毕赤酵母中的高效表达[J].中国生物工程杂志,2004,24(7):93-97.
作者姓名:张素芳  贾赟  蔡梅红  仇妍虹  陈溥言
作者单位:1. 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室, 南京 210095; 2. 沈阳农业大学动物医学院, 沈阳 110161
摘    要:选用毕赤酵母偏爱密码子 ,设计合成了新型抗菌肽基因。所合成的magainin基因和cecA mil杂合肽基因全长分别为 1 0 1bp和 60bp ,并在其N端引入kex2裂解位点 ,以保证表达抗菌肽具有天然N端。其中 ,cecA mil杂合肽基因根据cecropinAN端第 1~ 7个氨基酸残基、melittinN端第 5~ 1 2个氨基酸残基所设计合成。基因分别克隆入pPICZα A质粒 ,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα A mag和pPICZα A CM。在AOX1 (醇氧化酶 )启动子调控下 ,类似天然抗菌肽大小的magainin及cecA mil蛋白获得分泌表达 ,其表达量分别为 1 0 5mg L和 1 1 8mg L。初步抑菌活性测定 ,显示两者对金黄色葡萄球菌及E .coliDH5α有较好的抑杀活性。

关 键 词:抗菌肽  基因改造  SOE  毕赤酵母  分泌表达  
收稿时间:2004-02-25
修稿时间:2004年2月25日

Codon Optimization of Antibacterial Peptide Magainin and CecA-mil Gene and Over-expression in Pichia pastoris
ZHANG Su -fang JIA Yun {, } CAI Mei-hong QIU Yan |hong CHEN Pu -yan.Codon Optimization of Antibacterial Peptide Magainin and CecA-mil Gene and Over-expression in Pichia pastoris[J].China Biotechnology,2004,24(7):93-97.
Authors:ZHANG Su -fang JIA Yun {  } CAI Mei-hong QIU Yan |hong CHEN Pu -yan
Institution:ZHANG Su -fang +1 JIA Yun {1,2 } CAI Mei-hong 1 QIU Yan |hong 1 CHEN Pu -yan 1
Abstract:
Keywords:Antibacterial peptide  Genetic modification  SOE(gene splicing by overlap extension  gene SOEing)  Pichia pastoris  Secretion expression
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