| Ad.RGD-ING4-PTEN对MEG01人白血病细胞的抑制作用 |
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| 引用本文： | 黄,晨,王家融,杨吉成,盛伟华,缪竞诚.Ad.RGD-ING4-PTEN对MEG01人白血病细胞的抑制作用[J].中国生物工程杂志,2014,34(3):9-17. |
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| 作者姓名： | 黄 晨 王家融 杨吉成 盛伟华 缪竞诚 |
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| 作者单位： | 苏州大学医学部 苏州 215123 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(81001016) |
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| 摘 要： | 目的:构建RGD修饰的ING4和PTEN双基因共表达重组腺病毒载体(Ad.RGD-ING4-PTEN),研究其对人白血病细胞MEG01的抑制作用。方法:采用AdEasyTM腺病毒重组系统,在本科室已成功构建的pAdTrack-CMV-ING4-polyA-promoter、pAdTrack-CMV-polyA-promoter腺病毒转移质粒的基础上,在多克隆酶切位点的Not I、Xho I间插入PTEN片段,得到pAdTrack-CMVING4-polyA-promoter-PTEN重组转移载体,与RGD-4C修饰的腺病毒骨架质粒pAdEasy-1(RGD)同源重组后,经包装和扩增获得ING4和PTEN双基因共表达重组腺病毒Ad.RGD-ING4-PTEN。将Ad.RGD-ING4-PTEN体外感染人白血病细胞MEG01,检测腺病毒对MEG01细胞的感染效率,Western blot法检测外源基因ING4和PTEN在MEG01细胞中的表达,CCK8法检测外源基因的导入对MEG01细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测外源基因导入对MEG01细胞的凋亡和周期的影响。结果:鉴定结果显示,成功构建了Ad.RGD-ING4-PTEN双基因共表达腺病毒,其能有效地感染MEG01细胞。Western blot检测到ING4和PTEN在MEG01细胞中的表达;ING4和PTEN基因能明显抑制MEG01细胞的生长,诱导其凋亡并产生G2/M期阻滞作用,且双基因联合作用较单基因作用更明显。结论:成功构建了RGD-4C修饰的ING4和PTEN双基因共表达腺病毒载体Ad.RGD-ING4-PTEN。收获的腺病毒能有效感染人白血病MEG01细胞。Ad.RGD-ING4-PTEN具有抑制MEG01细胞的生长、诱导其凋亡及G2/M期阻滞的作用。
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| 关 键 词： | 腺病毒 ING4 PTEN 白血病 |
| 收稿时间： | 2013-12-24 |
The Inhibition of Ad. RGD-ING4-PTEN on MEG01 Human Leukemia Cell |
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| HUANG Chen,WANG Jia-rong,YANG Ji-cheng,SHENG Wei-hua,MIAO Jing-cheng.The Inhibition of Ad. RGD-ING4-PTEN on MEG01 Human Leukemia Cell[J].China Biotechnology,2014,34(3):9-17. |
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| Authors: | HUANG Chen WANG Jia-rong YANG Ji-cheng SHENG Wei-hua MIAO Jing-cheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Adenovirus ING4 PTEN Leukemia |
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