| 胰岛素受体底物1和2敲低对猪肝脏细胞糖脂代谢的影响 |
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| 引用本文： | 黄天晴,孔庆然,李,妍,于,淼,刘忠华.胰岛素受体底物1和2敲低对猪肝脏细胞糖脂代谢的影响[J].中国生物工程杂志,2014,34(4):27-35. |
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| 作者姓名： | 黄天晴 孔庆然 李 妍 于 淼 刘忠华 |
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| 作者单位： | 1. 东北农业大学胚胎工程实验室 哈尔滨 150030;
2. 哈尔滨职业技术学院 哈尔滨 150030 |
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| 基金项目： | 国家“863”计划(2012AA020601);国家转基因生物新品种培育重大专项(2013ZX08009003-006)资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:通过shRNA干扰高效敲低猪肝脏细胞中IRS1和IRS2基因的表达,进而验证其对于糖脂代谢相关基因表达的影响,为构建2型糖尿病模型猪奠定基础。方法:首先通过重叠PCR方法克隆了猪IRS1基因全部的mRNA序列(4 814bp)以及通过3'RACE方法克隆了猪IRS2基因的部分3'非编码区(3-untranslated region,3'UTR)。然后,通过Real-time PCR筛选获得了能显著敲低这两个基因的shRNA片段,并在同时敲低IRS1和IRS2的猪肝脏细胞中,检测糖脂代谢相关基因的表达。结果:猪肝脏细胞中IRS1和IRS2的表达被显著敲低,分别下降了78%和64%。另外,糖异生作用酶磷酸烯醇丙酮酸激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)和果糖-1,6-二磷酸酶(fructose-1,6-bisphosphatase,F-1,6-BP)基因表达显著上升,并导致催化肝脏中糖酵解反应的葡糖激酶(glucokinase,Gck)基因表达的显著下降。同时,胆固醇调节元件结合蛋白(sterol regulatory element-binding proteins,SREBP-1)基因的表达也显著上升以及胆固醇调节基因Abcg8,CYP7a1表达明显上调。结论:猪肝脏细胞中IRS1和IRS2基因的敲低可激活糖异生作用,并抑制糖酵解反应,从而导致糖代谢的异常,同时也能引起脂类代谢的异常。
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| 关 键 词： | IRS1 IRS2 RNA干扰 糖脂代谢 猪 |
| 收稿时间： | 2014-01-02 |
The Effect of Insulin Receptor Substrates 1 and 2 Knockdown on Porcine Hepatic Glucolipid Metabolism |
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| HUANG Tian-qing,KONG Qing-ran,LI Yan,YU Miao,LIU Zhong-hua.The Effect of Insulin Receptor Substrates 1 and 2 Knockdown on Porcine Hepatic Glucolipid Metabolism[J].China Biotechnology,2014,34(4):27-35. |
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| Authors: | HUANG Tian-qing KONG Qing-ran LI Yan YU Miao LIU Zhong-hua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | IRS1 IRS2 RNA interference Glucolipid metabolism Pig |
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