| 日本血吸虫三价DNA疫苗pVIVO2 SjFABP/Sj26.SjGAPDH的构建及其免疫保护作用评价 |
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| 引用本文： | 朱路,龙全科,刘海峰,鲁明波,胡媛,石佑恩,余龙江.日本血吸虫三价DNA疫苗pVIVO2 SjFABP/Sj26.SjGAPDH的构建及其免疫保护作用评价[J].中国生物工程杂志,2010,30(5):36-42. |
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| 作者姓名： | 朱路 龙全科 刘海峰 鲁明波 胡媛 石佑恩 余龙江 |
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| 作者单位： | 1.分子生物物理教育部重点实验室 武汉 430074
2.华中科技大学生命科学与技术学院 武汉 430074
3.华中科技大学同济医学院 武汉 430030 |
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| 基金项目： | 国家"863"计划，教育部博士点基金，教育部新世纪优秀人才计划 |
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| 摘 要： | 目的:构建含有日本血吸虫中国大陆株脂肪酸结合蛋白(SjFABP)，3-磷酸甘油醛脱氢酶(SjGAPDH)，26kDa谷胱甘肽S转移酶(Sj26)的三价DNA疫苗，并通过药理实验评价其抗血吸虫感染的免疫保护作用。 方法: 以血吸虫成虫RNA为模板制备cDNA第一链，RT-PCR扩增得到抗原基因片段，再通过重组PCR技术，将Sj26和SjGAPDH融合为Sj26.SjGAPDH基因。将SjFABP和Sj26.SjGAPDH分别克隆入pVIVO2的mcs1和mcs2，获得重组质粒pVIVO2-SjFABP/Sj26.SjGAPDH。瞬时转染MCF-7细胞，通过逆转录PCR（RT-PCR）检测抗原基因在mRNA水平的表达，通过间接荧光免疫（IIF）检测抗原基因在小鼠体内抗原水平表达，验证了DNA疫苗的有效性；并免疫小鼠后进行免疫保护性初步试验。结果: 经过酶切、测序及体内外表达验证，该三价DNA疫苗pVIVO2-SjFABP/Sj26.SjGAPDH构建成功；该三价DNA疫苗在小鼠抗血吸虫感染中诱发减虫率和减卵率达到58.6%和59.8%。结论: 该三价DNA疫苗组具有比单价和双价DNA疫苗组更加良好的免疫保护作用，为日本血吸虫DNA疫苗的研制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 3-磷酸甘油醛脱氢酶 26kDa谷胱甘肽S转移酶 三价DNA疫苗 |
| 收稿时间： | 2009-12-30 |
| 修稿时间： | 2010-03-26 |
Construction and Immuno-protection Evaluation of Trivalent-epitope DNA Vaccine pVIVO2-SjFABP/Sj26. SjGAPDH |
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| ZHU Lu,LONG Quan-ke,LIU Hai-feng,LU Ming-bo,HU Yuan,SHI You-en,YU Long-jiang.Construction and Immuno-protection Evaluation of Trivalent-epitope DNA Vaccine pVIVO2-SjFABP/Sj26. SjGAPDH[J].China Biotechnology,2010,30(5):36-42. |
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| Authors: | ZHU Lu LONG Quan-ke LIU Hai-feng LU Ming-bo HU Yuan SHI You-en YU Long-jiang |
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| Institution: | 1.Key Laboratory of Molecular Biophysics, Ministry of Education, Wuhan 430074, China
2.College of Life Science and Technology, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430074, China
3.Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Schistosama japanicum SjFABP SjGAPDH Sj26 Trivalent-epitope DNA vaccine |
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