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| 禽流感病毒H9N2血凝素基因和神经氨酸酶基因在真核酵母菌中的表达 | |
| 引用本文： | 张烨,于在江,唐启慧,陈禹保,辛丽,陈永坤,陈清轩,舒跃龙.禽流感病毒H9N2血凝素基因和神经氨酸酶基因在真核酵母菌中的表达[J].中国生物工程杂志,2010,30(7). |
| 作者姓名： | 张烨 于在江 唐启慧 陈禹保 辛丽 陈永坤 陈清轩 舒跃龙 |
| 作者单位： | 1. 中国疾病预防控制中心病毒病所国家流感中心,北京,100052 2. 北京标凯科技有限公司,北京,100094 3. 北京中亚国瑞生物经济研究所,北京,102206 |
| 摘 要： | 目的:克隆、表达和鉴定禽流感病毒H9N2血凝素基因(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶基因(neuramidinase,NA)序列,为制备抗体和基因工程疫苗打下基础。方法:在成功克隆禽流感病毒H9N2全长HA、NA基因并测序的基础上,将部分基因序列克隆到表达载体pMETA上,构建了重组表达质粒pMETA/HA(52～1545bp),pMETA/NA(121～1254bp),电转化真核酵母菌pMAD16,甲醇诱导表达,利用Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用Western blotting和ELISA方法检测其抗原性。结果:重组蛋白在酵母菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示蛋白表达后形成了二聚体,蛋白纯度占总蛋白的95%以上,ELISA和Western blotting实验证实,重组蛋白具有良好的抗原性。结论:成功克隆和表达了禽流感病毒H9N2HA、NA基因序列,为禽流感病毒H9N2诊断试剂和疫苗的开发等进一步的研究奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 禽流感病毒H9N2 血凝素 神经氨酸酶 真核酵母表达 |
Expression of the Hemagglutinin and Neuramidinase Gene of Influenza A Virus H9N2 in P.methanolica |
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| ZHANG Ye,YU Zai-jiang,TANG Qi-hui,CHEN Yu-bao,XIN Li,CHEN Yong-kun,CHEN Qing-xuan,SHU Yue-long.Expression of the Hemagglutinin and Neuramidinase Gene of Influenza A Virus H9N2 in P.methanolica[J].China Biotechnology,2010,30(7). | |
| Authors: | ZHANG Ye YU Zai-jiang TANG Qi-hui CHEN Yu-bao XIN Li CHEN Yong-kun CHEN Qing-xuan SHU Yue-long |
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