| 癌基因iASPP的克隆、表达与纯化 |
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| 引用本文： | 刁世勇,张新伟,饶青,邢海燕,陈森,王建祥,王敏.癌基因iASPP的克隆、表达与纯化[J].中国生物工程杂志,2005,25(5):36-40. |
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| 作者姓名： | 刁世勇 张新伟 饶青 邢海燕 陈森 王建祥 王敏 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院/中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室 天津 300020 |
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| 基金项目： | 国家杰出青年基金资助项目 (3 0 0 2 5 0 19)，国家自然科学基金资助项目 (3 0 3 70 5 93 )，天津市自然科学基金资助项目 (0 43 60 73 11) |
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| 摘 要： | iASPP是新近发现的高度保守的p53相关基因,其蛋白产物定位于细胞核内,具有结合NFκBp65亚基和p53功能,进而抑制NFκB的转录调节和p53对凋亡的调节功能。利用RTPCR方法从人白血病细胞系U937中克隆出癌基因iASPP,将其克隆至原核表达载体pET28a(+)中,成功构建iASPP表达载体PIAF,重组质粒读码框和序列与预期一致。在IPTG诱导下,重组载体大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株,表达产物经SDSPAGE和Westernblot方法分析证实系iASPP融合蛋白。利用Ni离子鳌合层析的方法纯化iASPP融合蛋白,经SDSPAGE鉴定其纯度超过80%。
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| 关 键 词： | p53 基因克隆 原核表达 纯化 iASPP |
| 修稿时间： | 2004年11月10 |
Cloning,Expression and Purification of Oncogene iASPP |
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| DIAO Shi-yong,ZHANG Xin-wei,RAO Qing,XING Hai-yan,CHEN Sen,WANG Jian-xiang,WANG Min.Cloning,Expression and Purification of Oncogene iASPP[J].China Biotechnology,2005,25(5):36-40. |
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| Authors: | DIAO Shi-yong ZHANG Xin-wei RAO Qing XING Hai-yan CHEN Sen WANG Jian-xiang WANG Min |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | iASPP p53 Gene clone Prokaryotic expression Purification |
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