| 高山被孢霉Δ6Ⅱ-脱饱和酶的克隆、表达和功能鉴定 |
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| 引用本文： | 史海粟,陈海琴,顾震南,张灏,陈永泉,陈卫.高山被孢霉Δ6Ⅱ-脱饱和酶的克隆、表达和功能鉴定[J].中国生物工程杂志,2015,35(12):37-44. |
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| 作者姓名： | 史海粟 陈海琴 顾震南 张灏 陈永泉 陈卫 |
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| 作者单位： | 江南大学食品学院 食品科学与技术国家重点实验室 无锡 214122 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(21276108)资助项目 |
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| 摘 要： | 产油微生物高山被孢霉中Δ6脱饱和酶是决定ω3/ω6脂肪酸代谢流的关键酶,该酶对不同底物的催化特性直接决定该菌体内脂肪酸的流向。在已完成基因组测序的高山被孢霉ATCC32222中经注释发现它存在两种Δ6脱饱和酶(Δ6-Ⅰ和Δ6-Ⅱ),选择对其中的Δ6-Ⅱ脱饱和酶进行克隆、表达和功能鉴定。首先以p YES2/NT C质粒为骨架构建了Δ6-Ⅱ脱饱和酶基因(FADS6-Ⅱ)的表达载体(p YES2/NT C-FADS6-Ⅱ),并转化至酿酒酵母中进行诱导表达,进一步通过在重组菌培养基中添加Δ6脱饱和酶的底物来考察Δ6-Ⅱ脱饱和酶对各底物的偏好作用。实验结果表明,在分别添加0.5 mmol/L亚油酸(LA)和0.5 mmol/Lα-亚麻酸(ALA)时,Δ6-Ⅱ脱饱和酶对LA的转化率为42.94%,对ALA没有催化作用。而当底物添加方式改为同时添加LA和ALA时(分别为0.25 mmol/L),Δ6-Ⅱ脱饱和酶对LA的转化率为37.12%,对ALA仍没有催化作用。该实验结果为高山被孢霉中Δ6-Ⅱ脱饱和酶的催化功能研究提供了理论依据。
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| 关 键 词： | Δ6脱饱和酶 底物偏好性 高山被孢霉 |
| 收稿时间： | 2015-07-29 |
Studies of the Cloning,Expression and Function Analysis for △6-Ⅱ Desaturase from Mortierella alpina |
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| SHI Hai-su,CHEN Hai-qin,GU Zhen-nan,ZHANG Hao,CHEN Yong-quan,CHEN Wei.Studies of the Cloning,Expression and Function Analysis for △6-Ⅱ Desaturase from Mortierella alpina[J].China Biotechnology,2015,35(12):37-44. |
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| Authors: | SHI Hai-su CHEN Hai-qin GU Zhen-nan ZHANG Hao CHEN Yong-quan CHEN Wei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Substrate preference Mortierella alpina Δ6 desaturase |
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