| 棘孢木霉几丁质酶tachi2 基因的原核表达及酶学性质研究 |
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| 引用本文： | 张军霞,丛大鹏,李雅华,咸洪泉.棘孢木霉几丁质酶tachi2 基因的原核表达及酶学性质研究[J].中国生物工程杂志,2013,33(6):45-51. |
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| 作者姓名： | 张军霞 丛大鹏 李雅华 咸洪泉 |
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| 作者单位： | 青岛农业大学 生命科学学院 青岛 266109 |
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| 基金项目： | 山东省自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:实现棘孢木霉(Trichoderma asperellum)几丁质酶基因tachi2的原核高效表达,研究几丁质酶Tachi2的酶学性质.方法:利用PCR技术扩增得到几丁质酶基因tachi2,将其克隆到原核表达载体pEHISTEV中,测序后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后进行Tachi2蛋白的纯化和复性.用纯化的目的蛋白Tachi2进行几丁质酶酶学性质的研究.结果:tachi2基因在重组大肠杆菌中正确表达,其主要以包涵体形式存在；重组蛋白Tachi2分子量约为44kDa,经过纯化和复性后得到的Tachi2有较高的几丁质酶活性.该酶的最适温度为40℃,最适pH值为7.0,几丁质酶在40℃以下比较稳定、pH 6～9时酶有较高活性,受Cu2和Zn2+的强烈抑制.结论:成功实现了棘孢木霉几丁质酶基因tachi2的原核高效表达,表达纯化了重组蛋白,明确了几丁质酶Tachi2的酶学性质,为该几丁质酶的进一步开发利用和深入研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 棘孢木霉 几丁质酶 原核表达 酶学性质 |
| 收稿时间： | 2013-04-01 |
Prokaryotic Expression of tachi2 Gene from Trichoderma asperellum and Characterization of Recombinant Enzyme |
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| ZHANG Jun-xia,CONG Da-peng,LI Ya-hua,XIAN Hong-quan.Prokaryotic Expression of tachi2 Gene from Trichoderma asperellum and Characterization of Recombinant Enzyme[J].China Biotechnology,2013,33(6):45-51. |
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| Authors: | ZHANG Jun-xia CONG Da-peng LI Ya-hua XIAN Hong-quan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Trichoderma asperellum Chitinase Prokaryotic expression Enzymatic properties |
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