| 结核分枝杆菌生物膜形成相关基因的筛选与鉴定 |
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| 引用本文： | 刘霞,郭庆龙,王若珺,王洪海,裴秀英,张雪莲.结核分枝杆菌生物膜形成相关基因的筛选与鉴定[J].中国生物工程杂志,2013,33(4):15-21. |
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| 作者姓名： | 刘霞 郭庆龙 王若珺 王洪海 裴秀英 张雪莲 |
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| 作者单位： | 1. 复旦大学生命科学学院遗传学研究所 遗传工程国家重点实验室 上海 200433;2. 宁夏医科大学 基础医学院生物化学与分子生物学系 宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室 医学科学技术研究中心 银川 750004 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:通过菌落表型变化并结合生物膜生长缺陷筛选并鉴定可能与生物膜形成相关基因.方法:利用带有Himarl转座子的MycoMarT7转座子系统建立结核分枝杆菌H37Ra随机插入突变库；筛选细菌表面结构发生变化和生物膜形成有变化的突变菌株；运用T-A克隆法并结合抗性标记挽救法获得突变菌株的随机插入基因侧翼序列从而鉴定突变基因,并运用生物信息学方法分析预测突变基因的功能.结果:通过菌落形态变化及生物膜缺陷表型筛选出39株突变株,成功鉴定其中16株突变株,涉及16个基因发生突变,其中5个与脂质代谢相关,4个与细胞壁合成相关、2个与中间代谢和呼吸作用相关、1个调节蛋白相关基因,1个毒力相关基因,1个PE/PPE家族基因,还有2个功能未知基因.结合生物膜形成缺陷分析,其中8个基因可能与H37Ra体外生物膜的形成相关.结论:成功构建库容量约为l×104结核分枝杆菌转座子随机插入突变文库,筛选获得生物膜生长受损突变株及可能与结核分枝杆菌生物膜形成相关的基因信息,为后续深入开展生物膜形成机制研究奠定基础.
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| 关 键 词： | 结核分枝杆菌 MycoMarT7噬菌体转座子 菌落形态 生物膜 |
| 收稿时间： | 2013-01-21 |
Screening and Identification of Mycobacterium tuberculosis Biofilm Formation Related Genes |
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| LIU Xia,GUO Qing-long,WANG Ruo-jun,WANG Hong-hai,PEI Xiu-ying,ZHANG Xue-lian.Screening and Identification of Mycobacterium tuberculosis Biofilm Formation Related Genes[J].China Biotechnology,2013,33(4):15-21. |
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| Authors: | LIU Xia GUO Qing-long WANG Ruo-jun WANG Hong-hai PEI Xiu-ying ZHANG Xue-lian |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycobacterium tuberculosis MycoMarT7 transposon Colony morphology Bacterial biofilm |
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