| 牛病毒性腹泻病毒E2蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定 |
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| 引用本文： | 王姝,朱远茂,蔡红,马磊,史鸿飞,吕闯,董秀梅,高欲燃,薛飞.牛病毒性腹泻病毒E2蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定[J].中国生物工程杂志,2013,33(4):40-45. |
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| 作者姓名： | 王姝 朱远茂 蔡红 马磊 史鸿飞 吕闯 董秀梅 高欲燃 薛飞 |
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| 作者单位： | 1. 东北农业大学 动物医学学院 哈尔滨 150001;2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室 哈尔滨 150001 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划子课题，中央级公益性科研院所基本科研业务费项目，哈尔滨市科技攻关计划项目 |
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| 摘 要： | 为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)糖蛋白E2单克隆抗体(MAb),利用原核表达并且纯化的重组糖蛋白E2(rE2)免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合.采用以BVDV为检测抗原的间接ELISA筛选阳性细胞克隆,经3次克隆纯化后获得2株稳定分泌抗E2特异性MAb的杂交瘤细胞株,分别命名为4E3与1G11.用4E3与1G11杂交瘤细胞株接种BALB/c小鼠制备腹水,采用rE2及BVDV包被的ELISA测得的效价分别是6.21×106和6.83×105及6.83×105和7.5×104.间接ELISA、Western blot、IFA试验表明两株杂交瘤细胞所分泌的MAb具有良好的反应性和特异性.经抗体亚类鉴定4E3与1G11均为IgM/K.特异性试验表明4E3与1G11这2株MAb均不与牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛腺病毒3型反应；其中4E3不与猪瘟病毒反应,而1G11则可与猪瘟病毒发生交叉反应,这种反应特性可试用于BVDV与猪瘟病毒的鉴别诊断.所制备的4E3与1G11 MAb可以用于BVDV抗原的检测,为建立检测BVDV E2蛋白血清抗体的ELISA奠定了基础.
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| 关 键 词： | 牛病毒性腹泻病毒 E2 单克隆抗体 IgM |
| 收稿时间： | 2012-12-03 |
Preparation and Preliminary Characterization of Monoclonal Antibodies against E2 Protein of Bovine Viral Diarrhea Virus |
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| WANG Shu,ZHU Yuan-mao,CAI Hong,MA Lei,SHI Hong-fei,L&#,Chuang,DONG Xiu-mei,GAO Yu-ran,XUE Fei.Preparation and Preliminary Characterization of Monoclonal Antibodies against E2 Protein of Bovine Viral Diarrhea Virus[J].China Biotechnology,2013,33(4):40-45. |
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| Authors: | WANG Shu ZHU Yuan-mao CAI Hong MA Lei SHI Hong-fei L&# Chuang DONG Xiu-mei GAO Yu-ran XUE Fei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bovine viral diarrhea virus E2 protein Monoclonal antibody IgM |
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