| 抗肠炎沙门氏菌单链抗体制备及其特异性分析 |
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| 引用本文： | 王报贵,武晓丽,董素琴,甘敏,陈星星,陈飞,明星,徐锋.抗肠炎沙门氏菌单链抗体制备及其特异性分析[J].中国生物工程杂志,2013,33(5):62-67. |
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| 作者姓名： | 王报贵 武晓丽 董素琴 甘敏 陈星星 陈飞 明星 徐锋 |
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| 作者单位： | 1. 南昌大学生命科学与食品工程学院 中德联合研究院 南昌 330047;2. 江西中医学院基础医学部 南昌 330004 |
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| 基金项目： | "十二五"国家科技支撑计划，国家自然科学基金，食品科学与技术国家重点实验室目标导向课题，自由探索课题，赣鄱英才555工程人才计划 |
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| 摘 要： | 目的:利用基因工程技术制备抗肠炎沙门氏菌的单链抗体.方法:从抗肠炎沙门氏菌单克隆抗体的杂交瘤细胞中纯化RNA,反转录后扩增出抗体的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因片段,采用重叠延伸的方法,用柔性多肽Linker接头(Gly4 Ser)3按VL-Linker-VH方式将VH基因和VL基因拼接成单链抗体基因片段后,连接到pGEX-4T-1载体上,进行重组转化.挑取阳性克隆,经IPTG诱导后,通过GST柱进行亲和层析,最后利用ELISA检测抗体的活性.结果:成功构建了表达抗肠炎沙门氏菌单链抗体的基因工程菌株,经SDS-PAGE和ELISA检测结果表明,诱导表达的单链抗体scFv分子量约为60 kDa,其能特异与肠炎沙门氏菌结合,但与副甲伤寒沙门氏菌、鸭沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌有轻度交叉反应.结论:成功构建了抗肠炎沙门氏菌单链抗体的表达菌株,表达的单链抗体scFv可作为沙门氏菌的检测的候选抗体分子.
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| 关 键 词： | 沙门氏菌 单链抗体 重链可变区 轻链可变区 |
| 收稿时间： | 2012-11-12 |
Preparation and Specificity Analysis of scFv Aganinst Salmonella enteritidis |
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| WANG Bao-gui,WU Xiao-li,DONG Su-qin,GAN Min,CHEN Xing-xing,CHEN Fei,MING Xing,XU Feng.Preparation and Specificity Analysis of scFv Aganinst Salmonella enteritidis[J].China Biotechnology,2013,33(5):62-67. |
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| Authors: | WANG Bao-gui WU Xiao-li DONG Su-qin GAN Min CHEN Xing-xing CHEN Fei MING Xing XU Feng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Salmonella enteritidis Single-chain antibody (scFv) Variable region of heavy chain(VH) Variable region of light chain (VL) |
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