| 白蛋白融合α-2b干扰素在毕赤酵母中的表达 |
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| 引用本文： | 张伍魁,范清林,邹文艺,仲皙,宋礼华.白蛋白融合α-2b干扰素在毕赤酵母中的表达[J].中国生物工程杂志,2005,25(12):45-49. |
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| 作者姓名： | 张伍魁 范清林 邹文艺 仲皙 宋礼华 |
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| 作者单位： | 1. 安徽医科大学基础医学院, 合肥 230032;
2. 安徽安科生物工程股份有限公司, 合肥 230088;
3. 中国药科大学, 南京 210009 |
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| 摘 要： | α2b干扰素的重组表达质粒pPIC9KHSAIFNα2b经限制性内切酶SalI酶切线性化后电转化巴斯德毕赤酵母菌(P.Pastoris)SMD1168,将阳性转化子进行PCR鉴定和Mut表型鉴定并用甲醇诱导表达,WesternBlot结果表明白蛋白融合IFNα蛋白与IFNα抗体具有结合能力,Wish细胞VSV病毒系统鉴定表达蛋白具有抗病毒生物活性。在摇瓶培养条件下,甲醇在0.5%～4.0%的范围,随着浓度的升高蛋白表达量也升高,在其他因素固定时,菌体起始OD值在5～80的范围内,随着OD值的升高表达量反而下降。成功表达出具有高生物学活性的白蛋白融合干扰素蛋白(HSAIFNα2b),为进一步应用打下基础。
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| 关 键 词： | 白蛋白融合α-2b干扰素 巴斯德毕赤酵母菌 Wish细胞 VSV病毒系统 |
| 收稿时间： | 2005-11-15 |
| 修稿时间： | 2005-12-05 |
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