| 靶向B细胞并特异结合其分泌IL-10的重组融合蛋白的构建、表达和初步鉴定 * |
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| 引用本文： | 赵荣,陈含宇,黄春,章晓联,潘勤.靶向B细胞并特异结合其分泌IL-10的重组融合蛋白的构建、表达和初步鉴定 *[J].中国生物工程杂志,2018,38(2):1-6. |
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| 作者姓名： | 赵荣 陈含宇 黄春 章晓联 潘勤 |
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| 作者单位： | 武汉大学基础医学院免疫学系 病毒学国家重点实验室 湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室 武汉 430071 |
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| 基金项目： | * 国家自然科学基金(31771875;81471910;31370197;21572173;31770145);湖北省医学领军人才计划(523-276003);湖北省技术创新专项(2016ACA150;2016CFA062;2015CFA009);武汉市科技晨光计划 资助项目(2016070204010127) |
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| 摘 要： | 目的:CD19单链抗体可变区(single-chain fragment variable)sc Fv能特异性识别结合B细胞表面的CD19分子,白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)是调节性B细胞(Breg)的主要特征之一。旨在构建CD19sc Fv和IL-10受体1(IL-10R1)胞外段的重组融合蛋白,拟用该融合蛋白捕捉和封闭Breg细胞分泌的IL-10。方法:CD19sc Fv和IL-10R1胞外段克隆到p ET-28a原核质粒上,E.coli BL21(DE3)工程菌表达蛋白通过镍柱富集和纯化蛋白,SDS-PAGE和Western blot对表达蛋白进行鉴定,Pull down实验验证蛋白与CD19分子和IL-10细胞因子的结合。结果:成功表达CD19sc Fv-IL-10R1融合蛋白,该融合蛋白能在体外同时结合CD19和IL-10分子。结论:CD19sc Fv-IL-10R1融合蛋白在体外可以同时结合CD19分子和IL-10分子,具有潜在应用前景可作为特异性抑制Breg的生物小分子。
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| 关 键 词： | IL-10 调节性B细胞 IL-10受体1 CD19单链抗体可变区 |
| 收稿时间： | 2017-07-28 |
Construction,Expression and Identification of Recombinant Fusion Protein Specifically Targeting B Cells and Binding to IL-10 |
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| Rong ZHAO,Han-yu CHEN,Chun HUANG,Xiao-lian ZHANG,Qin PAN.Construction,Expression and Identification of Recombinant Fusion Protein Specifically Targeting B Cells and Binding to IL-10[J].China Biotechnology,2018,38(2):1-6. |
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| Authors: | Rong ZHAO Han-yu CHEN Chun HUANG Xiao-lian ZHANG Qin PAN |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | IL-10 Regulatory B cells IL-10R1 CD19-scFv |
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