| GLP-1-IgG4-Fc融合蛋白的表达与鉴定 |
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| 引用本文： | 陈英,肖海鹏,张晓焰,龚庆伟,马利,李文佳,陈小锋.GLP-1-IgG4-Fc融合蛋白的表达与鉴定[J].中国生物工程杂志,2018,38(7):58-66. |
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| 作者姓名： | 陈英 肖海鹏 张晓焰 龚庆伟 马利 李文佳 陈小锋 |
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| 作者单位： | 广东东阳光药业有限公司 东莞 523867 |
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| 基金项目： | 广东省引进创新科研团队计划(201101Y0104990178) |
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| 摘 要： | 将合成的人胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)突变体基因与IgG4抗体的Fc部分进行融合获得GLP-1-IgG4-Fc片段,获得的基因片段与pXC17.4载体进行连接,用电转化方法将线性化质粒稳定转染CHO-K1细胞,通过Clone Pix 2筛选出高表达细胞株,产量达1.5g/L。收集培养上清并经Protein A和Source 30Q纯化,得到的GLP-1-IgG4-Fc融合蛋白,SDS-PAGE纯度高于95%,高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)纯度和毛细管区域凝胶电泳(capillary zone electrophoresis,CZE)纯度均不低于80%,尺寸排阻层析(size-exclusion chromatography,SEC)纯度高于99%。经质谱和肽图谱测定,分子量与理论值一致,肽图谱序列与对照品高度一致。生物学活性分析表明,GLP-1-IgG4-Fc融合蛋白具有促进表达有GLP-1受体的HEK293细胞分泌环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,c AMP)的活性,并且该活性与对照品高度相似。
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| 关 键 词： | 重组人胰高血糖素样肽-1 GLP-1-IgG4-Fc融合蛋白 CHO细胞 生物学活性 |
| 收稿时间： | 2017-12-19 |
Expression and Characterization of Recombinant GLP-1-IgG4-Fc Fusion Protein |
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| Ying CHEN,Hai-peng XIAO,Xiao-yan ZHANG,Qing-wei GONG,Li MA,Wen-jia LI,Xiao-feng CHEN.Expression and Characterization of Recombinant GLP-1-IgG4-Fc Fusion Protein[J].China Biotechnology,2018,38(7):58-66. |
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| Authors: | Ying CHEN Hai-peng XIAO Xiao-yan ZHANG Qing-wei GONG Li MA Wen-jia LI Xiao-feng CHEN |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Recombinant human glucagon like peptide-1 GLP-1-IgG4-Fc fusion protein CHO cell Biological activity |
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