AP-2γ基因的克隆、表达及其部分生物活性的测定 |
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引用本文: | 肖顺勇,张鹏飞,熊熙文,王业启,吴厚雄,张健.AP-2γ基因的克隆、表达及其部分生物活性的测定[J].中国生物工程杂志,2004,24(5):65-68,72. |
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作者姓名: | 肖顺勇 张鹏飞 熊熙文 王业启 吴厚雄 张健 |
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作者单位: | 1. 湖南师范大学生命科学学院, 长沙 410081;
2. 湖南省农业环境监测管理站, 长沙 410005 |
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基金项目: | 国家杰出青年科学基金资助项目 ( 3 0 0 2 5 0 0 9) |
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摘 要: | AP 2γ基因是AP 2基因家族中非常重要的转录激活因子 ,它对脊椎动物的胚胎发育起着十分重要的作用 ,并与细胞的生长及癌变有一定的联系。将人的AP 2γ基因插入表达载体GST系统中的pGEX 4T 2的谷胱苷肽 S 转移酶基因下游 ,转化E .coliDH5α ,鉴定挑选出阳性菌落并扩大培养 ,提取重组质粒进行DNA测序 ,确定其阅读框码的正确性。再将正确的重组质粒转化E .coliBL2 1 ,用异丙基硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导后 ,在Tac启动子作用下 ,表达出一条 81kDa的蛋白质带 ,所得蛋白质用谷胱苷肽琼脂糖 4B纯化后 ,得到融合蛋白质 ,通过凝胶迁移率变动分析和免疫印迹分析实验 ,测得该蛋白质的部分生物活性 ,结果表明 ,它具有很好的生物学活性 ,为进一步对AP 2γ基因的功能进行研究打下了良好的基础。
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关 键 词: | AP-2γ基因 GST表达系统 基因表达 生物活性 |
收稿时间: | 2003-12-08 |
修稿时间: | 2004-03-05 |
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