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整合缺陷型重组慢病毒载体构建及HCV重组假型慢病毒颗粒的制备与性状分析
引用本文:管洁,邓瑶,文波,陈红,王文,谭文杰.整合缺陷型重组慢病毒载体构建及HCV重组假型慢病毒颗粒的制备与性状分析[J].中国生物工程杂志,2013,33(6):62-67.
作者姓名:管洁  邓瑶  文波  陈红  王文  谭文杰
作者单位:1. 卫生部医学病毒与病毒病重点实验室 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 北京 102206; 2. 煤炭总医院中心实验室 北京 100028
基金项目:十一五传染病重大专项(项目编号:2009ZX10004-705,-715)
摘    要:为提高慢病毒载体应用的安全性及改进HCV新型颗粒疫苗的制备,首先对传统的慢病毒三质粒系统进行改造:将包装质粒pHR' CMV△R8.2改造成整合缺陷型的包装质粒pHR'CMV△R8.2D64E,并在体外感染实验验证其整合缺陷性;将转移质粒中的报告基因GFP替换成HCV的NS3基因,选用表达3种亚型(1a、1b、2a) HCV包膜E1E2的包膜质粒,用改造后的三质粒系统制备了3种亚型(1a,1b,2a)的假型丙型肝炎病毒(HCV)整合缺陷型慢病毒颗粒,并用Western blot方法确定了颗粒上包膜蛋白的表达,通过电镜可观察到浓缩后的HCV慢病毒颗粒结构,HCV慢病毒颗粒感染Huh7细胞后可观察到转基因NS3的表达.为安全高效的慢病毒载体的应用及HCV假型颗粒疫苗研发提供了新的技术路线.

关 键 词:整合缺陷  慢病毒载体  丙型肝炎病毒  假型颗粒  
收稿时间:2013-01-29

Development and Characterization of Integration-deficient Lentiviral Vector and HCV Recombinant Pseudotyped Lentiviral Particles
GUAN Jie,DENG Yao,WEN Bo,CHEN Hong,WANG Wen,TAN Wen-Jie.Development and Characterization of Integration-deficient Lentiviral Vector and HCV Recombinant Pseudotyped Lentiviral Particles[J].China Biotechnology,2013,33(6):62-67.
Authors:GUAN Jie  DENG Yao  WEN Bo  CHEN Hong  WANG Wen  TAN Wen-Jie
Abstract:
Keywords:Integration-defective  Lentiviral vector  Hepatitis C virus  Pseudotyped lentiviral particles
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