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犬瘟热病毒H蛋白基因重组腺病毒的构建及免疫效果评估
引用本文:袁颖烁,宋菲菲,刘国强,刘晔,张守峰,张乐萃,扈荣良.犬瘟热病毒H蛋白基因重组腺病毒的构建及免疫效果评估[J].中国生物工程杂志,2014,34(1):64-70.
作者姓名:袁颖烁  宋菲菲  刘国强  刘晔  张守峰  张乐萃  扈荣良
作者单位:1. 青岛农业大学动物科技学院 青岛 266109;2. 军事医学科学院军事兽医研究所 省部共建吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室 长春 130122
基金项目:国家公益性行业(农业)科研专项经费资助项目(201203056)
摘    要:研究选取犬瘟热病毒H蛋白基因为目的基因,利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、酶切、连接等方法构建出重组人5型腺病毒穿梭质粒和骨架质粒,两者共转染293AD细胞并包装出重组腺病毒。通过电镜负染、酶切鉴定、Western blot及一步生长曲线测定等方法进行病毒的生物学特性鉴定,证明犬瘟热病毒H蛋白基因重组腺病毒构建正确。犬分别肌肉接种CDV疫苗毒和重组腺病毒,并检测免疫后第14,28,42,56,70,84d时犬血清中抗CDV中和抗体的变化情况。结果显示,犬免疫重组腺病毒后体内产生的抗CDV平均中和抗体水平高于对照组,滴度最高达2-8。研究表明,正确构建的重组腺病毒具有良好的免疫原性,诱导产生的抗犬瘟热病毒中和抗体达到犬最低免疫保护水平,为进一步研发犬瘟热病毒活载体疫苗提供理论依据。

关 键 词:犬瘟热病毒  H基因  腺病毒  免疫效果  
收稿时间:2013-03-25
修稿时间:2013-12-03

Construction and Immune Efficacy of Recombinant Adenovirus Expressing H Gene of Canine Distemper Virus
YUAN Ying-shuo,SONG Fei-fei,LIU Guo-qiang,LIU Ye,ZHANG Shou-feng,ZHANG Le-cui,HU Rong-liang.Construction and Immune Efficacy of Recombinant Adenovirus Expressing H Gene of Canine Distemper Virus[J].China Biotechnology,2014,34(1):64-70.
Authors:YUAN Ying-shuo  SONG Fei-fei  LIU Guo-qiang  LIU Ye  ZHANG Shou-feng  ZHANG Le-cui  HU Rong-liang
Institution:1. Qingdao Agriculture University, College of Animal Science and Technology, Qingdao 266109, China;2. Jilin Provincial Key Laboratory of Zoonosis Prevention and Control, and Military Veterinary Research Institute, Academy of Military Medical Sciences, Changchun 130122, China
Abstract:
Keywords:Canine distemper virus  Hemagglutinin gene  Adenovirus  Immune efficacy
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