重组截短型TGF-βⅡ型受体蛋白对肝纤维化大鼠的治疗作用研究 |
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引用本文: | 马洪闯,柏合,张哲,赵冰海,曹雅男,李洪志,刘洁婷,张春雷,冯彪,初彦辉.重组截短型TGF-βⅡ型受体蛋白对肝纤维化大鼠的治疗作用研究[J].中国生物工程杂志,2014,34(12):16-22. |
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作者姓名: | 马洪闯 柏合 张哲 赵冰海 曹雅男 李洪志 刘洁婷 张春雷 冯彪 初彦辉 |
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作者单位: | 1. 佳木斯大学基础医学院生物化学与分子生物学系 佳木斯 154007;
2. 牡丹江医学院 黑龙江省抗纤维化生物治疗重点实验室 牡丹江 157011;
3. 牡丹江医学院 黑龙江省高校组织损伤与修复重点实验室 牡丹江 157011 |
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基金项目: | 国家自然科学基金青年科学基金(81200305);2011年度黑龙江省教育厅重点研究项目计划(12511z028)资助项目 |
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摘 要: | 目的:研究截短型TGF-βⅡ型受体蛋白对肝纤维化大鼠的治疗作用。方法:取含有重组截短型TGF-βⅡ型受体载体的大肠杆菌BL21,通过培养繁殖,诱导,纯化得到重组截短型TGF-βⅡ型受体蛋白。使用CCl4诱导的方法来制备肝纤维化大鼠模型,观察截短型TGF-βⅡ型受体蛋白对大鼠肝纤维化的影响。SDS-PAGE检测纯化的截短型TGF-βⅡ型受体蛋白。生化检测血清谷丙转氨酶(glutamic pyruvic transaminase,ALT)及谷草转氨酶(glutamic oxalacetic transaminase,AST)含量。用实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法和免疫荧光方法来检测各组大鼠肝组织中的α平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA),1型胶原(collagen1,Col1)和4型胶原(collagen4,Col4)的表达情况。用HE,MASSON,PAS这三种病理学染色的方法来观察各组大鼠肝纤维化的变化。结果:SDS-PAGE检测结果显示,纯化后获得高纯度截断型TGF-βⅡ型受体蛋白。截短型TGF-βⅡ型受体蛋白治疗组可以减少血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶的含量。截短型TGF-βⅡ型受体蛋白治疗组可以降低肝组织中α-SMA、FN、Col1和Col4的mRNA和蛋白质的表达。三种病理学染色的方法显示,与肝纤维化大鼠模型组相比,治疗组的纤维化程度明显减轻。结论:重组截短型TGF-βⅡ型受体蛋白对大鼠肝纤维化的程度有抑制作用,为治疗肝纤维化及其他纤维化疾病提供了一个潜在的治疗手段。
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关 键 词: | 肝纤维化 转化生长因子&beta 受体 |
收稿时间: | 2014-09-24 |
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