| RNA干扰NUP88基因对人乳腺癌MCF-7细胞生长及侵袭力的影响 |
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| 引用本文： | 李玉强,朱志图,王巍,李谌,徐娜,王钰,李男,孙宏治.RNA干扰NUP88基因对人乳腺癌MCF-7细胞生长及侵袭力的影响[J].中国生物工程杂志,2014,34(9):31-39. |
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| 作者姓名： | 李玉强 朱志图 王巍 李谌 徐娜 王钰 李男 孙宏治 |
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| 作者单位： | 辽宁医学院附属第一医院 锦州 121001 |
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| 基金项目： | 辽宁省教育厅教学计划(L201145);辽宁省高等学校优秀人才支持计划(LJQ2011091)资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建重组慢病毒介导的NUP88-shRNA载体,通过RNAi技术分别观察沉默NUP88后对MCF-7增殖,粘附,侵袭和转移情况的影响,为乳腺癌的临床基因治疗寻找新的靶点。方法:构建NUP88重组慢病毒表达载体,包装后检测滴度,以最佳复感染指数转染乳腺癌MCF-7细胞,利用RT-PCR和Western blot检测各组MCF-7细胞中mRNA和蛋白的表达效率;MTT法和流式细胞仪检测法,检测NUP88基因被干扰后对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响;细胞侵袭实验检测NUP88基因被干扰后对MCF-7侵袭力的影响。结果四组病毒及一组阴性对照均构建成功,滴度均为4E+8TU/ml;RT-PCR和Western blot检测,结果表明:经NUP88-shRNA转染的MCF-7细胞组NUP88 mRNA和蛋白质的表达与经阴性转染组和空白MCF-7细胞组相比,差异明显具有统计学意义(P0.01);测定NUP88-shRNA1组沉默效率最高,沉默率可达到86%;MTT法结果表明:实验组经NUP88-shRNA1慢病毒转染后细胞增殖程度显著减少,与空白组和对照组相比有显著性差异(P0.05)。流式细胞仪检测三组MCF-7细胞凋亡结果表明:实验组经慢病毒转染后细胞凋亡率显著增加,与对照组和空白组相比有显著性差异(P0.05);细胞侵袭实验表明:在肿瘤细胞常规培养24h后,实验组与空白组和阴性对照组比较,穿膜细胞数量明显减少,具有显著性差异(P0.05)结论:NUP88重组慢病毒可以通过RNAi成功抑制MCF-7中NUP88基因的表达,并能显著抑制其增殖及远处的侵袭能力。
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| 关 键 词： | 人乳腺癌细胞MCF-7 RNAi 慢病毒载体 NUP88 |
| 收稿时间： | 2014-07-08 |
Effect of Silencing Nup88 Gene by RNA Interference on Growth and Invasion in Human Breast Cancer MCF-7 Cell |
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| LI Yu-qiang,ZHU Zhi-tu,WANG Wei,LI Chen,XU Na,WANG Yu,LI Nan,SUN Hong-zhi.Effect of Silencing Nup88 Gene by RNA Interference on Growth and Invasion in Human Breast Cancer MCF-7 Cell[J].China Biotechnology,2014,34(9):31-39. |
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| Authors: | LI Yu-qiang ZHU Zhi-tu WANG Wei LI Chen XU Na WANG Yu LI Nan SUN Hong-zhi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | NUP88 Human breast cancer cells MCF-7 RNAi Lentivirus vectors |
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