重组人GPx7的原核表达、纯化及其抗肿瘤活性检测

研究大肠杆菌表达重组人谷胱甘肽过氧化物酶7(glutathione peroxidase 7,GPx7),并对纯化精制的重组人GPx7进行体内抗肿瘤活性检测。以质粒pCDNA3.1(-)-GPx7为模板,PCR扩增获得N-端去除信号肽的GPx7基因片段,构建的重组质粒pET24A-GPx7在E.coli BL21(DE3)中诱导表达。采用Sulfopropyl强阳离子交换层析和Superdex 75分子排阻层析纯化精制获得原核表达的重组人GPx7蛋白。该蛋白的体外催化活性微弱,但S180荷瘤小鼠连续14d注射GPx7蛋白后,肿瘤生长受到抑制,抑制率为29.26%,与对照组相比具有显著差异。实验结果表明,采用阳离子交换和分子排阻层析两步法可纯化精制原核表达的重组人GPx,重组人GPx7蛋白在荷瘤小鼠模型中表现出体内抗肿瘤活性。