| 调节猪TNF-α表达的miRNAs鉴定 |
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| 引用本文： | 李虹仪,习欠云,张永亮.调节猪TNF-α表达的miRNAs鉴定[J].中国生物工程杂志,2014,34(10):35-40. |
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| 作者姓名： | 李虹仪 习欠云 张永亮 |
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| 作者单位： | 1. 龙岩学院生命科学学院 预防兽医学与生物技术福建省高等学校重点实验室 龙岩 364012;
2. 华南农业大学动物科学学院 广州 510642 |
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| 基金项目： | 转基因生物新品种培育科技重大专项重点项目(2014ZX08009-048B);国家自然科学基金(31272529)资助项目 |
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| 摘 要： | 肿瘤坏死因子α(TNF-α)是脂肪细胞的分泌产物之一,在脂肪中行使着复杂的调节功能,为了研究猪脂肪组织中TNF-α的表达受到哪些miRNA的调控,从猪脂肪组织基因组中获得猪TNF-α3'端非翻译区(UTR)序列,与荧光素酶质粒PGL3-control连接构建猪TNF-α的萤光素酶表达质粒PGL3-TNF-α3'UTR。生物信息学预测miR-19a,miR-124,miR-130a,miR-301,miR-506等miRNAs均靶向猪TNF-α,将这些miRNA分别与PGL3-TNF-α3'UTR质粒共转到细胞中,以乱序序列作为阴性对照(NC),检测miRNA对质粒荧光素酶活性的作用。结果发现miR-19a,miR-124和miR-130a均能够显著抑制萤光素酶的活性(P0.01),为了验证这3个miRNA是否通过各自种子序列起调控作用,突变了PGL3-TNF-α3'UTR中这3个miRNA种子序列的结合位点,结果发现miRNAs对突变质粒中的荧光素酶均无明显抑制作用(P0.05)。结果证明,miR-19a,miR-124和miR-130a与猪TNF-α均有直接的靶向关系并通过各自种子序列抑制TNF-α的表达。
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| 关 键 词： | 肿瘤坏死因子α miRNA荧光素酶 |
| 收稿时间： | 2014-07-22 |
Identification miRNAs That Regulate Porcine TNF-α Expression Through Targeting TNF-α UTR |
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| LI Hong-yi,XI Qian-yun,ZHANG Yong-liang.Identification miRNAs That Regulate Porcine TNF-α Expression Through Targeting TNF-α UTR[J].China Biotechnology,2014,34(10):35-40. |
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| Authors: | LI Hong-yi XI Qian-yun ZHANG Yong-liang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | TNF-α miRNA Luciferase assay |
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