| HIV-1整合酶蛋白的可溶性表达及功能研究 |
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| 引用本文： | 程绍辉,马晓慧,何红秋,刘斌,陈慰祖,王存新.HIV-1整合酶蛋白的可溶性表达及功能研究[J].中国生物工程杂志,2006,26(1):22-26. |
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| 作者姓名： | 程绍辉 马晓慧 何红秋 刘斌 陈慰祖 王存新 |
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| 作者单位： | 北京工业大学生命科学与生物工程学院 北京工业大学生命科学与生物工程学院 北京工业大学生命科学与生物工程学院 北京工业大学生命科学与生物工程学院 北京工业大学生命科学与生物工程学院 |
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| 基金项目： | 中国科学院资助项目;北京市教委科研项目 |
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| 摘 要： | HIV 1整合酶是HIV病毒复制中一个重要的酶，也是治疗艾滋病药物的一个重要靶点。为了开展以整合酶蛋白为靶点的抑制剂筛选，构建HIV 1整合酶重组质粒，在原核细胞中进行可溶性表达和功能研究。通过重叠PCR技术引入F185K和C280S突变于HIV 1 B亚型标准株的整合酶cDNA片段中，PCR扩增片段克隆到pET 28a(+)表达载体中，构建重组质粒，在E. coli中进行整合酶基因表达，SDS PAGE鉴定表达产物，亲和层析纯化蛋白，酶联免疫吸附实验方法测定整合酶的生物学活性。结果构建的重组质粒获得高效稳定的可溶性表达，ELISA实验证实该蛋白具有整合酶的3′切割DNA和5′链转移的活性。HIV 1整合酶蛋白的可溶性表达和活性研究为建立以整合酶为靶点的抗HIV药物筛选平台打下了基础。
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| 关 键 词： | 克隆 表达 ELISA HIV-1 整合酶 |
| 收稿时间： | 2006-01-25 |
| 修稿时间： | 2005年8月4日 |
Prokaryotic Expression of Integrase Enzyme of HIV-1 and The Function Study of Intergrase Protein |
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| CHENG Shao-hui,MA Xiao-hui,HE Hong-qiu,LIU Bin,CHEN Wei-zu,WANG Cun-xin.Prokaryotic Expression of Integrase Enzyme of HIV-1 and The Function Study of Intergrase Protein[J].China Biotechnology,2006,26(1):22-26. |
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| Authors: | CHENG Shao-hui MA Xiao-hui HE Hong-qiu LIU Bin CHEN Wei-zu WANG Cun-xin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HIV-1 ELISA |
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