| 人源性基因PLC-γ1中SH2-SH2-SH3 结构域的克隆、表达及纯化 |
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| 引用本文： | 金玉莲,金宁一,项泽萍,任云霞,陈庆森.人源性基因PLC-γ1中SH2-SH2-SH3 结构域的克隆、表达及纯化[J].中国生物工程杂志,2008,28(11):9-13. |
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| 作者姓名： | 金玉莲 金宁一 项泽萍 任云霞 陈庆森 |
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| 作者单位： | 1. 天津市食品生物技术重点实验室;天津商业大学生物技术与食品科学学院
2. 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
3. 天津商业大学生物技术与食品科学学院 |
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| 摘 要： | 利用RT-PCR技术将人源性PLC-γ1中的SH2-SH2-SH3 结构域基因扩增并克隆到载体pGEX-2T中，经热激反应转化到大肠杆菌BL21菌株内，在低温（33℃）下、利用IPTG诱导表达构建的重组基因的高效表达体系，利用谷胱甘肽琼脂糖（sepharose ）4B纯化得到高表达的重组蛋白。SDS-PAGE 和Western blot检测表明，PLC-γ1的SH2-SH2-SH3 结构域重组基因可在低温（33℃）条件下在E .coliBL21细胞中稳定完整表达，但是在较高温度下（37℃）会产生SH2-SH2-SH3 结构域不完全表达的现象。上述研究结果为人源性重组基因PLC-γ1中SH2-SH2-SH3 结构域的深入研究和广泛应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人源性PLC-γ1 SH2-SH2-SH3 domain 基因克隆 表达 |
| 收稿时间： | 2008-02-20 |
| 修稿时间： | 2008-09-16 |
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