| 基于HPV16E7蛋白CTLs抗原肽的病毒样颗粒治疗性疫苗的构建 |
| |
| 引用本文： | 褚晓杰,李杨,龙琼,姚宇峰,孙文佳,黄惟巍,杨旭,刘存宝,马雁冰.基于HPV16E7蛋白CTLs抗原肽的病毒样颗粒治疗性疫苗的构建[J].中国生物工程杂志,2015,35(2):45-51. |
| |
| 作者姓名： | 褚晓杰 李杨 龙琼 姚宇峰 孙文佳 黄惟巍 杨旭 刘存宝 马雁冰 |
| |
| 作者单位： | 1. 中国医学科学院/北京协和医学院 医学生物学研究所 昆明 650118;
2. 云南省重大传染病疫苗研发重点实验室 昆明 650118;
3. 云南省重大传染病疫苗工程技术研究中心 昆明 650118 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(31270030);云南省面上项目(2010ZC232);中央高校基本科研业务费(2012N08)资助项目 |
| |
| 摘 要： | 目的:构建呈递HPV16 E7 CTLs抗原表位的病毒样颗粒,并初步评价病毒样颗粒作为治疗性疫苗载体的潜能。方法:根据文献选择有效的HPV16 E7 CTLs表位,合成其正负链寡核苷酸序列,并通过退火形成双链DNA片段。将片段克隆于表达乙肝核心抗原的重组质粒p Thio His AHBc Ag,使抗原肽得以呈现于病毒样颗粒。重组菌经IPTG诱导后经SDS-PAGE鉴定目的蛋白表达。菌体破碎后经硫酸铵盐析法和蔗糖密度梯度离心进行纯化,并经高效液相凝胶过滤色谱和电镜鉴定病毒样颗粒的存在。制备的病毒样颗粒免疫接种了TC-1细胞的肿瘤模型小鼠,检测小鼠肿瘤大小。此外,在体外以抗原肽刺激脾细胞,以ELISA检测IFN-γ表达水平。结果:构建的三个重组表达质粒经酶切鉴定及测序分析证实构建正确。表达的重组蛋白大小与预期相符,并形成了病毒样颗粒。免疫小鼠后显示了抑制肿瘤增长的一定作用趋势。此外,抗原肽体外刺激促进了疫苗免疫小鼠脾细胞IFN-γ的表达,显示疫苗引起机体产生E7特异性的细胞免疫应答。结论:HBc Ag VLPs是有潜能的治疗性疫苗载体。
|
| 关 键 词： | 病毒样颗粒 治疗性疫苗 人乳头瘤病毒 |
| 收稿时间： | 2014-11-26 |
Development of a HPV16 E7 CTLs Peptides-based Virus-like Particle Therapeutic Vaccine |
| |
| CHU Xiao-jie;LI Yang;LONG Qiong;YAO Yu-feng;SUN Wen-jia;HUANG Wei-wei;YANG Xu;Liu Cun-bao;MA Yan-bing.Development of a HPV16 E7 CTLs Peptides-based Virus-like Particle Therapeutic Vaccine[J].China Biotechnology,2015,35(2):45-51. |
| |
| Authors: | CHU Xiao-jie;LI Yang;LONG Qiong;YAO Yu-feng;SUN Wen-jia;HUANG Wei-wei;YANG Xu;Liu Cun-bao;MA Yan-bing |
| |
| Institution: | CHU Xiao-jie;LI Yang;LONG Qiong;YAO Yu-feng;SUN Wen-jia;HUANG Wei-wei;YANG Xu;Liu Cun-bao;MA Yan-bing;Institute of Medical Biology,Chinese Academy of Medical Science & Peking Union Medical College;Yunnan Key Laboratory of Vaccine Research&Development on Severe Infectious Disease;Yunnan Engineering Research Center of Vaccine Research and Development on Severe Infectious Disease; |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Virus-like particles(VLPs) Therapeutic vaccine Human papillomavirus |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《中国生物工程杂志》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中国生物工程杂志》下载免费的PDF全文 |
