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重楼活性单体pp-10通过抑制PI3K/Akt通路诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡和自噬
引用本文:王娟娟,张鹏,黄志宏,陈家劲,李强,王国才,李药兰,蒋建伟.重楼活性单体pp-10通过抑制PI3K/Akt通路诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡和自噬[J].中国生物工程杂志,2015,35(2):31-37.
作者姓名:王娟娟  张鹏  黄志宏  陈家劲  李强  王国才  李药兰  蒋建伟
作者单位:1. 暨南大学医学院 广州 510632; 2. 暨南大学附属第一医院 广州 510632; 3. 暨南大学药学院中药及天然产物研究所 广州 510632
基金项目:广东省科技计划项目(2011B031800012);广东省医学科学技术研究基金(A2014379)资助项目
摘    要:目的:探讨重楼/七叶一枝花(Paris polyphylla)的醇提物单体pp-10诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡和自噬及其分子机制。方法:采用MTT法和克隆形成抑制实验观察不同浓度的重楼单体pp-10对人胃癌BGC-823细胞的增殖抑制作用;Hoechst33342染色法检测pp-10作用于人胃癌BGC-823细胞后细胞核形态的改变;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;Western blotting检测重楼单体pp-10对细胞凋亡和自噬相关蛋白Caspase-3、Caspase-9、(ADP-核糖)聚合酶(PARP)、Bax、Bcl-2、LC3、P62以及PI3K/Akt信号通路相关蛋白(Akt、p-Akt、m TOR、p-m TOR、P70s6k、p-P70s6k)表达的影响。结果:重楼单体pp-10能显著抑制BGC-823细胞的生长,作用呈时间-效应关系及剂量-效应关系;克隆形成抑制实验表明随着pp-10浓度的增加,细胞克隆形成逐渐减少,与对照组相比有显著差异;在荧光显微镜下观察可见其细胞核固缩、边聚、裂解等细胞凋亡形态学变化;流式细胞术检测显示,随着作用药物浓度的增高,其凋亡率逐渐升高;Western blotting结果表明,随着药物浓度的增加,线粒体相关凋亡信号通路蛋白Caspase9、Caspase3及PARP均出现酶切活化条带,细胞促凋亡蛋白Bax的表达水平增加,抗凋亡蛋白Bcl-2减少,自噬相关蛋白Ⅱ型LC3增加,P62蛋白减少,p-Akt蛋白的表达水平下降,Akt下游蛋白p-m Tor、p-p70S6K表达减少。结论:重楼单体pp-10通过抑制BGC-823细胞增殖,诱导细胞凋亡和自噬,与下调P13K/Akt信号通路有关。

关 键 词:重楼  胃癌  BGC-823  细胞  Akt  凋亡和自噬  
收稿时间:2014-11-18

Pp-10, a Monomer Purified from Paris polyphylla,Induces Apoptosis and Autophagy of Human Gastric Carcinoma BGC-823 Cells by Inhibiting PI3K/Akt Signaling Pathway
WANG Juan-juan;ZHANG Peng;HUANG Zhi-hong;CHEN Jia-jin;LI Qiang;WANG Guo-cai;LI Yao-lan;JIANG Jian-wei.Pp-10, a Monomer Purified from Paris polyphylla,Induces Apoptosis and Autophagy of Human Gastric Carcinoma BGC-823 Cells by Inhibiting PI3K/Akt Signaling Pathway[J].China Biotechnology,2015,35(2):31-37.
Authors:WANG Juan-juan;ZHANG Peng;HUANG Zhi-hong;CHEN Jia-jin;LI Qiang;WANG Guo-cai;LI Yao-lan;JIANG Jian-wei
Institution:WANG Juan-juan;ZHANG Peng;HUANG Zhi-hong;CHEN Jia-jin;LI Qiang;WANG Guo-cai;LI Yao-lan;JIANG Jian-wei;Department of Biochemistry,Medical College,Jinan University;Department of Pulmonary,The First Affiliated Hospital,Jinan University;Institute of Traditional Chinese Medicine and Nature Products,College of Pharmacy;
Abstract:
Keywords:Paris polyphylla  Gastric carcinoma  BGC-823 cell lines  Akt  Apoptosis and autophagy  
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