| 抗α2δ1/CD3双特异性抗体的制备和功能的初步研究 |
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| 引用本文： | 杨笑莹,李梦,赵威,唐敏,张志谦.抗α2δ1/CD3双特异性抗体的制备和功能的初步研究[J].中国生物工程杂志,2020,40(7):9-14. |
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| 作者姓名： | 杨笑莹 李梦 赵威 唐敏 张志谦 |
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| 作者单位： | 1 重庆医科大学检验医学院 临床检验诊断学教育部重点实验室 重庆 4000162 北京大学肿瘤医院细胞生物室 北京 100142 |
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| 基金项目： | * 国家重点研发计划(2016YFC1303400);国家自然科学基金资助项目(81730075) |
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| 摘 要： | 目的:构建抗α2δ1和CD3的双特异性抗体,并在体外初步评价其杀伤肝癌细胞的功能。方法:通过基因工程技术,构建BiTE形式的anti-α2δ1/CD3双特异性抗体(BsAb),转染Expi 293F细胞96h后,使用镍离子亲和色谱纯化出双特异性抗体,使用流式细胞术检测anti-α2δ1/CD3BsAb对α2δ1和CD3的结合性质,使用Perkin Elmer Operetta高内涵成像仪测定anti-α2δ1/CD3BsAb介导细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)对高表达α2δ1的人肝癌细胞Hep-12的杀伤效应,ELISA法检测杀伤过程中CTLs分泌hIL-2和hIFN-γ的变化。结果:anti-α2δ1/CD3 BsAb可以特异性结合α2δ1和CD3,anti-α2δ1/CD3 BsAb可以有效介导CTLs靶向杀伤高表达α2δ1的人肝癌细胞Hep-12,其介导杀伤Hep-12细胞的EC_(50)为8pmol/L,对于低表达α2δ1的人肝癌细胞Hep-11,anti-α2δ1/CD3 BsAb不能介导CTLs发挥杀伤作用,并且在杀伤过程中Hep-12细胞组CTLs释放的hIL-2和h IFN-γ比Hep11细胞组显著增多(P 0.05)。结论:anti-α2δ1/CD3 BsAb能有效介导CTLs体外杀伤高表达α2δ1的人肝癌细胞Hep-12,为双特异性抗体的肝癌免疫治疗奠定了一定的基础。
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| 关 键 词： | 双特异性抗体 BiTE α2δ1 CD3 |
| 收稿时间： | 2020-02-22 |
Preparation and Preliminary Characterization of Anti-α2δ1/CD3 Bispecific Antibody |
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| YANG Xiao-ying,LI Meng,ZHAO Wei,TANG Min,ZHANG Zhi-qian.Preparation and Preliminary Characterization of Anti-α2δ1/CD3 Bispecific Antibody[J].China Biotechnology,2020,40(7):9-14. |
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| Authors: | YANG Xiao-ying LI Meng ZHAO Wei TANG Min ZHANG Zhi-qian |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bispecific antibody BiTE α2δ1 CD3 |
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