| 以核糖体蛋白L7/L12为分子标志物精准检测肺炎链球菌的研究 |
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| 引用本文： | 王猛,宋慧茹,程雨洁,王毅,杨波,胡征.以核糖体蛋白L7/L12为分子标志物精准检测肺炎链球菌的研究[J].中国生物工程杂志,2020,40(4):34-41. |
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| 作者姓名： | 王猛 宋慧茹 程雨洁 王毅 杨波 胡征 |
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| 作者单位： | 1 湖北工业大学生物工程与食品学院 武汉 4300682 发酵工程教育部重点实验室(湖北工业大学) 武汉 4300683 工业发酵湖北省协同创新中心 武汉 430068 |
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| 基金项目： | * 湖北省科技厅自然科学青年基金项目(2017CFB226) |
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| 摘 要： | 目的:以核糖体蛋白L7/L12为标志物,探索一种胶体金免疫层析法快速检测肺炎链球菌的方法。方法:分析核糖体蛋白L7/L12基因序列,构建原核表达载体,表达纯化重组蛋白,免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体;利用无标记分子相互作用仪检测抗原抗体亲和力;以双抗夹心法研制胶体金免疫层析检测试纸条,并对其特异性、敏感性及稳定性进行验证分析。结果:筛选得到两株高效分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,两种单克隆抗体均与抗原有高的亲和力并且无竞争,制作的试纸最低检出限为1. 0×105CFU/ml;其与肺炎链球菌有特异性反应,而与其它9种常见呼吸道病原菌均无交叉反应;试纸条在25℃下保存12个月仍具有良好的重复性和稳定性。结论:RP-L7/L12可作为肺炎链球菌的检测标志物,以其单抗制备的胶体金免疫层析试纸可适用于肺炎链球菌的快速检测。
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| 关 键 词： | 肺炎链球菌 核糖体蛋白L7/L12 单克隆抗体 胶体金免疫层析法 |
| 收稿时间： | 2019-10-10 |
Accurate Detection of Streptococcus pneumoniae by Using Ribosomal Protein L7 / L12 as Molecular Marker |
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| WANG Meng,SONG Hui-ru,CHENG Yu-jie,WANG Yi,YANG Bo,HU Zheng.Accurate Detection of Streptococcus pneumoniae by Using Ribosomal Protein L7 / L12 as Molecular Marker[J].China Biotechnology,2020,40(4):34-41. |
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| Authors: | WANG Meng SONG Hui-ru CHENG Yu-jie WANG Yi YANG Bo HU Zheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Streptococcus pneumoniae Ribosomal protein L7/L12 Monoclonal antibody Colloidal gold immunochromatography |
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