基因串联原核高效表达胸腺肽α1

人工合成含有SD序列、胸腺肽α1(Tα1)基因、纯化标签和酶切位点的DNA序列作为构建元件，利用同尾酶将其依次克隆到pET-32a(+)中，得到含有1-8个不同重复数目的含SD序列基因的串联表达载体，利用PCR初步鉴定和进一步的测序证实序列完全正确。进而利用lacZ基因作为指示基因，将带有SD序列的lacZ基因克隆到不同Tα1基因串数载体末尾，利用蓝白斑实验验证启动子后不同SD序列的效率，证实串联载体中的各个SD序列均能有效启动翻译。在此基础上对各串表达载体进行摇瓶发酵，SDS-PAGE电泳检测证实各串均可正确表达Tα1，且为可溶性表达。本文为小肽原核高效表达提出了新方法，有望成为小肽高效表达的新途径。