| 重组人巨细胞病毒嵌合肽基因在毕赤酵母中的克隆和表达 |
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| 引用本文： | 谢琪璇,余巍,潘善培,肖銮娟,彭雅林,张春雪.重组人巨细胞病毒嵌合肽基因在毕赤酵母中的克隆和表达[J].中国生物工程杂志,2005,25(3):29-34. |
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| 作者姓名： | 谢琪璇 余巍 潘善培 肖銮娟 彭雅林 张春雪 |
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| 作者单位： | 暨南大学生殖免疫研究所 广州 510632 |
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| 基金项目： | 深圳市科技计划重点资助项目 |
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| 摘 要： | 为了在毕赤酵母中表达带有组氨酸纯化标记的重组人巨细胞病毒嵌合肽(rHCMVp),根据 其基因序列,设计引物从pPIC9K2rHCMVp 上扩增得到目的基因片段,并导入毕赤酵母诱导型表达 载体pPICZαA 中。通过电击将线性化的重组质粒转化到毕赤酵母X33 细胞中,筛选获得表达量 较高的重组菌株,研究了该菌株生长的培养条件,包括不同诱导时间、甲醇浓度、pH 值对人巨细 胞病毒嵌合肽表达的影响。2L 发酵罐进行了高密度发酵,经1 %的甲醇、pH610 的条件下诱导 48h,最终菌体密度OD600达到180,每升发酵液中含目的蛋白7817mg,产量比摇瓶提高了418 倍。 rHCMVp 可通过高密度发酵大量获得。
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| 关 键 词： | 重组人巨细胞病毒嵌合肽 毕赤酵母 高密度发酵 |
| 修稿时间： | 2004年10月19 |
Cloning and Expression of Recombinant Human Cytomegalovirus Peptide Gene in Pichia pastoris |
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| XIE Qi-xuan,YU Wei,PAN Shan-pei,XIAO Luan-juan,PENG Ya-ling,ZHANG Chun-xue.Cloning and Expression of Recombinant Human Cytomegalovirus Peptide Gene in Pichia pastoris[J].China Biotechnology,2005,25(3):29-34. |
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| Authors: | XIE Qi-xuan YU Wei PAN Shan-pei XIAO Luan-juan PENG Ya-ling ZHANG Chun-xue |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Recombinant human cytomegalovirus peptide(rHCMVp) Pichia pastoris High-density fermentation |
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