| 粘质沙雷氏菌PL-06磷脂酶A1基因大肠杆菌优化表达 |
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| 引用本文： | 苏燕南,薛正莲,陈涛,马琦亚.粘质沙雷氏菌PL-06磷脂酶A1基因大肠杆菌优化表达[J].中国生物工程杂志,2013,33(7):36-42. |
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| 作者姓名： | 苏燕南 薛正莲 陈涛 马琦亚 |
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| 作者单位： | 安徽工程大学生物与化学工程学院 微生物发酵安徽省工程技术研究中心 芜湖 241000 |
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| 基金项目： | 安徽省自然科学基金，安徽省高校自然科学基金 |
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| 摘 要： | 以粘质沙雷氏菌PL-06基因组为模板扩增得到磷脂酶A1基因plaA和含有辅助蛋白的磷脂酶A1基因plaB.plaA和plaB基因与pET-28a(+)连接后转入大肠杆菌BL21(DE3)表达,得到基因工程菌AP28和BP28.AP28最佳的诱导表达条件为诱导初始OD600值0.5,IPTG浓度为0.2mmol/L,诱导温度为37℃,诱导时间为4h,优化后磷脂酶A1蛋白表达水平从32％上升至46％,包涵体复性的磷脂酶A1酶活从10.8U/ml上升到12U/ml,相对于BP28工程菌,目的蛋白的表达对宿主细胞毒性小,而且得到的蛋白容易纯化.因此通过优化磷脂酶A1基因plaA的诱导条件,使磷脂酶A1以大量的包涵体形式表达,从而得到较高活性的磷脂酶A1并避免其对宿主细胞的毒性是可行的,而且可以得到大量纯化的磷脂酶A1蛋白,方便下一步的研究.
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| 关 键 词： | 粘质沙雷氏菌 磷脂酶A1 诱导表达 包涵体复性 细胞毒性 |
| 收稿时间： | 2012-12-04 |
The Optimized Phospholipase A1 Gene Expression of Serratia marcescens PL-06 in E.coli |
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| SU Yan-nan,XUE Zheng-lian,CHEN Tao,MA Qi-ya.The Optimized Phospholipase A1 Gene Expression of Serratia marcescens PL-06 in E.coli[J].China Biotechnology,2013,33(7):36-42. |
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| Authors: | SU Yan-nan XUE Zheng-lian CHEN Tao MA Qi-ya |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Serratia marcescens Phospholipase A1 Induced expression Inclusion bodies refolding Cell toxicity |
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