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曼地亚红豆杉植株中GGPP合成酶的克隆与分析
引用本文:肖明贵,余龙江,刘智,程华,向福,周智德.曼地亚红豆杉植株中GGPP合成酶的克隆与分析[J].中国生物工程杂志,2004,24(2):45-50.
作者姓名:肖明贵  余龙江  刘智  程华  向福  周智德
作者单位:华中科技大学生命科学与技术学院, 武汉 430074
基金项目:国家“九五”重点科技攻关项目 ( 96 C0 2 0 3 0 1),863计划项目(10 20 6 0 1)
摘    要:从 5年生曼地亚红豆杉 (Taxusmedia)的当年生新鲜枝叶中提取分离出mRNA ,然后根据已知植物的牛儿基牛儿基焦磷酸合成酶基因 (GGPPS基因 )DNA序列保守区设计特异简并引物。RT PCR获得了一条大小约 60 0bp的扩增谱带 ,回收该特异谱带并进行TA克隆 ,蓝白斑筛选 ,得到若干阳性克隆。经过质粒大小比较和PCR验证后 ,进行序列测定和同源性比较。发现该序列属于GGPP合成酶的片断 ,与Taxuscanadensis (AAD 1 60 1 8 1 )和Abiesgrandis (AAL1 761 4 2 )的GGPP合成酶相应区段的氨基酸序列一致性为 98%和 86%。蛋白质序列分析发现该序列含有一个特征的异戊二烯合成酶保守的结构域。进化树分析表明 ,曼地亚红豆杉GGPPS在进化上位于植物类 ,靠近古细菌类。曼地亚红豆杉GGPPS基因的克隆为研究红豆杉生产紫杉醇的分子机理和转基因植株的构建奠定了良好的基础。

关 键 词:曼地亚红豆杉  牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶  RT-PCR  
收稿时间:2003-11-30
修稿时间:2003年11月30

Cloning and Analysis of a cDNA Fragment Encoding Geranylgeranyl Diphosphate Synthase in Taxus media
XIAO Ming-gui,YU Long-jiang,LIU Zhi,CHENG Hua,XIANG Fu,ZHOU Zhi-de.Cloning and Analysis of a cDNA Fragment Encoding Geranylgeranyl Diphosphate Synthase in Taxus media[J].China Biotechnology,2004,24(2):45-50.
Authors:XIAO Ming-gui  YU Long-jiang  LIU Zhi  CHENG Hua  XIANG Fu  ZHOU Zhi-de
Abstract:
Keywords:Taxus media  GGPPS  RT-PCR
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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