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牛β-酪蛋白基因的克隆及乳腺特异性表达载体的构建
引用本文:杨瑞锋,刘金龙,安志兴,李志艳,张涌.牛β-酪蛋白基因的克隆及乳腺特异性表达载体的构建[J].中国生物工程杂志,2005,25(B04):260-263.
作者姓名:杨瑞锋  刘金龙  安志兴  李志艳  张涌
作者单位:西北农林科技大学生物工程研究所,杨凌712100
基金项目:国家“863”计划资助项目(2001AA213081)
摘    要:利用PCR技术分3段克隆了长约9.7kb的牛β-酪蛋白基因,分别克隆在pGEM-T easy Vector的T位点。经NCBI Blastn分析,与牛β-酪蛋白基因相应区段的同源性为98%。这3段序列包含完整的5’侧翼序列、前8个外显子及第8个内含子的部分序列。以此构建了两个乳腺特异性表达载体:利用第1段和第2段共有的酶切位点将两段融合,作为5’调控区(6.8kb),第3段和实验室已有的600bp的加尾信号通过重组PCR拼接作为3’调控区(3.4kb)构建了一乳腺特异性表达载体;以第一段作为5’调控区,实验室已有的600bp加尾信号作为3’为调控区构建了另一乳腺特异性表达载体。可以应用于进一步乳腺生物反应器的研制。

关 键 词:牛β-酪蛋白基因  克隆  载体构建
收稿时间:2004-10-22
修稿时间:2005-01-04

Cloning of Bovine Beta-Casein Gene and Construction of Mammary Gland-Specific Expression Vector
YANG Rui-feng, LIU Jin-long, AN Zhi-xing, LI Zhi-yan, ZHANG Yong.Cloning of Bovine Beta-Casein Gene and Construction of Mammary Gland-Specific Expression Vector[J].China Biotechnology,2005,25(B04):260-263.
Authors:YANG Rui-feng  LIU Jin-long  AN Zhi-xing  LI Zhi-yan  ZHANG Yong
Abstract:
Keywords:Bovine beta-casein Cloning Vector construction
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