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重组链激酶及其三种突变体的活性研究
引用本文:李荣贵,王娴,杜桂彩,郭道森.重组链激酶及其三种突变体的活性研究[J].中国生物工程杂志,2004,24(8):82-87.
作者姓名:李荣贵  王娴  杜桂彩  郭道森
作者单位:1. 青岛大学生物系, 青岛 266071; 2. 山东大学生命科学学院, 济南 250100
基金项目:山东省教育厅科技计划资助项目 (J99E)
摘    要:利用PCR技术从Streptococucspyogenes的基因组DNA中扩增了链激酶的编码基因ska,并进行了序列分析 ,利用基因删除及定点位变技术获得了删除了C-末端 42个氨基酸残基编码区的突变链激酶基因skaΔC42 ,第 5 9位Lys残基突变为Glu的突变链激酶基因skaK5 9E以及删除C-末端 42个氨基酸且第 5 9位Lys残基突变为Glu的突变链激酶基因skaΔC42K5 9E ,将ska及其三种突变体分别克隆到表达载体pET 1 5b上 ,构建分别表达野生型链激酶 (SK)、C-末端缺失 42个氨基酸残基的突变体 (SKΔC42 )、第 5 9位Lys残基突变为Glu的突变体 (SKK5 9E)及C-末端缺失 42个氨基酸且第 5 9位Lys残基突变为Glu突变体 (SKΔC42K5 9E)的表达载体pSK ,pSKΔC42 ,pSK K5 9E ,pSKΔC42K5 9E ,分别转化E .coliBL2 1 (DE3) ,IPTG诱导后在大肠杆菌中实现了高效表达 ,经亲和层析、离子交换层析及分子筛层析 ,获得了rSK、rSKΔC42、rSKK5 9E及rSKΔC42K5 9E ,活性分析表明rSK与其三种突变体具有相同的比活性。

关 键 词:链激酶  突变体  活性  
收稿时间:2004-03-24
修稿时间:2004年3月24日

Activity Studies on the Recombinant Streptokinase and its Three Mutants
LI Rong-gui WANG Xian DU Gui-cai GUO Dao-sen.Activity Studies on the Recombinant Streptokinase and its Three Mutants[J].China Biotechnology,2004,24(8):82-87.
Authors:LI Rong-gui WANG Xian DU Gui-cai GUO Dao-sen
Institution:LI Rong-gui+1 WANG Xian+2 DU Gui-cai+1 GUO Dao-sen+1
Abstract:
Keywords:Streptokinase Mutant Activity
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