| 拟南芥K+转运蛋白AtKup1基因的DNA改组 |
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| 引用本文： | 郭兆奎,杨谦,姚泉洪,万秀清,颜培强.拟南芥K+转运蛋白AtKup1基因的DNA改组[J].中国生物工程杂志,2006,26(7). |
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| 作者姓名： | 郭兆奎 杨谦 姚泉洪 万秀清 颜培强 |
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| 作者单位： | 哈尔滨工业大学生命科学与工程系，哈尔滨工业大学生命科学与工程系，上海市农科院生物技术中心，黑龙江省烟草科学研究所，黑龙江省烟草科学研究所 哈尔滨 150001，哈尔滨 150001，上海 201106，牡丹江 157011，牡丹江 157011 |
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| 基金项目： | 国家烟草专卖局科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 采用同源重组法制备钾离子转运蛋白基因TRKI和TRK2缺失的酿酒酵母钾营养缺陷型。通过RNA反转录PCR方法从拟南芥幼根扩增获得片段长度为2 139bp的AtKup1基因,以此片段为膜板,采用DNA重排技术,经DNase I降解,Primerless PCR和Primer PCR建立AtKup1基因突变库。将突变库和未经DNA重排处理的AtKup1基因分别构建酵母穿梭载体,并导入K 转运蛋白基因TRK1和TRK2缺失的酿酒酵母中,分别在低钾(5．0mmoL／L KC1)不合色氨酸的培养基上筛选转化子,从突变基因库酵母转化子中获得2株长势明显优于AtKup1基因转化子的突变基因转化菌株,菌株质粒上的突变AtKup1基因核苷酸测序结果表明突变基因AtKup1发生了2个碱基的置换,造成了2个氨基酸的改变。转化烟草烟叶化学成分分析证实突变基因的吸钾活性显著提高。
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| 关 键 词： | AtKup1基因 DNA改组 酿酒酵母缺陷型 |
DNA Shuffling of Arabidopsis thalianna K + Uptake Transporter Gene |
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| GUO Zhao-kui YANG Qian YAO Quan-hong WAN Xiu-qing YAN Pei-qiang.DNA Shuffling of Arabidopsis thalianna K + Uptake Transporter Gene[J].China Biotechnology,2006,26(7). |
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| Authors: | GUO Zhao-kui YANG Qian YAO Quan-hong WAN Xiu-qing YAN Pei-qiang |
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