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微流控芯片对乳腺癌细胞MDA-MB-231的捕获及再培养研究
引用本文:桑维维,常亚男,李娟.微流控芯片对乳腺癌细胞MDA-MB-231的捕获及再培养研究[J].中国生物工程杂志,2015,35(6):46-53.
作者姓名:桑维维  常亚男  李娟
作者单位:1. 中国科学院高能物理研究所 北京 100049; 2. 安徽大学生命科学学院 合肥 230601
基金项目:"973"国家重大科技计划项目(2015CB932104)、国家自然科学青年基金(11405185)资助项目
摘    要:目的:利用实验室构建的微流控芯片对乳腺癌细胞(MDA-MB-231)进行捕获,提高捕获率并保证细胞活性,实现再培养。抗肿瘤药物阿霉素处理正常培养和再培养的细胞,分析细胞内的基因表达变化。方法:对微流控芯片进行基底修饰,利用MUC1抗原与抗体特异性结合捕获肿瘤细胞,优化捕获条件提高捕获率。对微流控芯片捕获的细胞进行分离、收集和再培养。用1μmol/L阿霉素对正常培养和再培养的细胞分别孵育24h,然后提取RNA并逆转录合成c DNA。选择乳腺癌细胞中高表达及与肿瘤转移相关的基因FN1、ITGA6和LAMB3设计引物,以c DNA为模板分别进行RT-PCR扩增,对琼脂糖凝胶电泳结果进行灰度分析。结果:经MUC1抗体修饰的微流控芯片能有效地捕获肿瘤细胞,捕获率达80%±3%,释放率约98%,细胞释放后存活率高实现再培养。阿霉素对正常培养和再培养的乳腺癌细胞中FN1、ITGA6和LAMB3的基因表达均有抑制作用。结论:MUC1抗体修饰的微流控芯片能有效捕获乳腺癌细胞并实现再培养,捕获前后细胞内基因表达无显著差异,均能产生药物敏感性。

关 键 词:微流控芯片  捕获再培养  阿霉素  MDA-MB-231  
收稿时间:2015-03-17

The Development of Microfluidic Chip for the Capture of Breast Cancer Cells and Its Effect on Captured Cells
SANG Wei-wei,CHANG Ya-nan,LI Juan.The Development of Microfluidic Chip for the Capture of Breast Cancer Cells and Its Effect on Captured Cells[J].China Biotechnology,2015,35(6):46-53.
Authors:SANG Wei-wei  CHANG Ya-nan  LI Juan
Abstract:
Keywords:Microfluidic device  Capture and re-culture  Doxorubicin  MDA-MB-231  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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