| 慢病毒载体导入种蛋内鸡胚技术研究 |
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| 引用本文： | 燕海峰,易康乐,TREFIL P,胡雄贵,邓缘,朱立军.慢病毒载体导入种蛋内鸡胚技术研究[J].中国生物工程杂志,2012,32(12):73-79. |
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| 作者姓名： | 燕海峰 易康乐 TREFIL P 胡雄贵 邓缘 朱立军 |
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| 作者单位： | 1. 湖南省畜牧兽医研究所 长沙 410131;2. 捷克生物医药研究所 布拉格 25449 |
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| 基金项目： | 国际科技合作计划(中方2010-96-39-1);捷克教育部资金(No.10104)资助项目 |
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| 摘 要： | 种蛋内鸡胚含有潜在的胚胎干细胞(BCs)或原生殖细胞(PGCs),是目前主要的转基因鸡研究方法。采用绿色荧光蛋白(GFP)基因的pLenti6/v5-DEST-GFP慢病毒表达载体,白来航鸡与伊萨鸡种蛋,结合种蛋赤道面开窗专利技术,对含这两种细胞胚的转基因技术进行了比较研究:转染白来航鸡囊胚,孵化13天时,GFP基因的PCR检出率为64.7%,孵化率极低;转染孵化72h伊萨鸡胚血液循环中PGCs,实验蛋孵化率为35.0%,在出壳后死亡的3只小鸡肝脏中,GFP基因的PCR检出率为100%,存活的4只鸡中有3只在12月龄的血液样品中,经PCR扩增出了GFP基因;转染孵化72～79h白来航鸡胚PGCs,7批次实验的平均孵化率为21.1%,能在赤道面窗口注射胚的种蛋比率,以73～77h胚龄的最高,为75.0%～92.9%,注射病毒组出壳雏鸡血液DNA中,GFP基因PCR检出率为44.4%。两种方法比较,PGCs方法在实验蛋孵化率、胚定位在赤道面窗口率等方面有较强优势。因此为种蛋内胚细胞的转基因鸡技术研究提供了系统、可操作性强的方法。
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| 关 键 词： | 慢病毒载体 种蛋 胚 |
| 收稿时间： | 2012-08-08 |
Transgenic Chickens Made by Injection of Lentiviral into Eggs |
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| YAN Hai-fen,YI Kang-le,TREFIL P,HU Xong-gui,DENG Yuang,ZHU Li-jun.Transgenic Chickens Made by Injection of Lentiviral into Eggs[J].China Biotechnology,2012,32(12):73-79. |
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| Authors: | YAN Hai-fen YI Kang-le TREFIL P HU Xong-gui DENG Yuang ZHU Li-jun |
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| Institution: | 1(1 Hunan Institute of Animal and Veterinary Science,Changsha 410131,China)(2 Research Institute of Biopharmacy and Veterinary Drugs,Prague 25449,Czech REP) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lentivirus vector Fertile eggs Embryos Transgenic chicken |
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