治疗型VP22△-mE6△/mE7重组蛋白疫苗的表达与免疫学初步分析

制备16型人乳头瘤病毒mE6Δ/mE7蛋白与I型人单纯疱疹病毒VP22Δ蛋白的治疗型分子内佐剂融合蛋白疫苗，并检测其免疫原性和抗肿瘤相关生物活性。通过克隆HSV-1 VP22Δ及HPV-16 mE6Δ/mE7基因，构建pET28a-VP22Δ-mE6Δ/mE7原核表达载体。重组质粒在Rosetta（DE3）宿主菌中进行诱导表达，表达蛋白经分离、复性后，通过镍离子亲和层析进行纯化，纯化蛋白经SDS-PAGE、Western blot 鉴定，并免疫BalB/C及C57BL/6小鼠，检测其免疫原性和抗肿瘤活性。结果显示，VP22Δ-mE6Δ/mE7蛋白以包涵体形式表达，分子量约为34kDa，表达量约占菌体总蛋白的45%。该蛋白免疫小鼠后血清特异性IgG、特异性淋巴细胞增殖效果及对TC-1致瘤小鼠的肿瘤治疗效果均高于无佐剂单一重组蛋白疫苗。以上结果说明，所获得的重组融合蛋白具有较好的免疫原性和抗肿瘤活性，为治疗型HPV分子内佐剂疫苗的进一步研究奠定了基础。