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GPRC6A过表达前列腺癌细胞株构建及EMT相关研究
引用本文:盛彬,杨帆,孙心旖,陈瑶,李莉,杨建一,杜圣家,刘铭.GPRC6A过表达前列腺癌细胞株构建及EMT相关研究[J].中国生物工程杂志,2017,37(3):18-26.
作者姓名:盛彬  杨帆  孙心旖  陈瑶  李莉  杨建一  杜圣家  刘铭
作者单位:1. 山西医科大学基础医学院 太原 030001; 2. 北京协和医学院研究生院 北京 100005
基金项目:国家青年科学基金(81302220),山西省青年科学基金(2014021037-1),山西医科大学博士启动基金(B03201204)资助项目
摘    要:目的:构建GPRC6A基因过表达的前列腺癌LncapC4-2细胞株,检测细胞迁移和侵袭能力改变及EMT相关基因表达,为研究GPRC6A介导的EMT在前列腺癌发生发展过程中的作用奠定基础。方法:构建过表达GPRC6A的慢病毒载体pCDH-GPRC6A,人胚肾293T细胞包被病毒并感染Lncap C4-2细胞株,Puromycin筛选获得稳定过表达GPRC6A的细胞株。RT-PCR和Western blot验证细胞GPRC6A的过表达情况。划痕和transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,qPCR检测EMT相关基因表达。结果:成功构建GPRC6A表达的慢病毒载体,RT-PCR和Western blot检测LncapC4-2 GPRC6A过表达细胞株中GPRC6A的mRNA和蛋白质表达增高,与对照相比较,在过表达GPRC6A的LncapC4-2细胞中,细胞迁移和侵袭能力增强,并且EMT相关基因E-cadherin表达降低而SNAIL表达增高。结论:成功构建过表达的GPRC6A的前列腺癌细胞株,肿瘤细胞中的GPRC6A可能通过增强细胞迁移和侵袭能力并促进细胞EMT而参与前列腺癌发生发展过程。

关 键 词:前列腺癌  上皮间质转化  GPRC6A  
收稿时间:2016-09-29

Construction of the Stable Prostate Cancer Cell Lines Overexpress GPRC6A and EMT Study
SHENG Bin,YANG Fan,SUN Xin-yi,CHEN Yao,LI Li,YANG Jian-yi,DU Sheng-jia,LIU Ming.Construction of the Stable Prostate Cancer Cell Lines Overexpress GPRC6A and EMT Study[J].China Biotechnology,2017,37(3):18-26.
Authors:SHENG Bin  YANG Fan  SUN Xin-yi  CHEN Yao  LI Li  YANG Jian-yi  DU Sheng-jia  LIU Ming
Abstract:
Keywords:GPRC6A  EMT  Prostate cancer  
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