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抗埃博拉病毒核蛋白抗体的制备与双抗夹心ELISA检测方法的建立
引用本文:刘俊伟,常瑞恒,回鹏,董士尚,王金凤,孙波,杨诚.抗埃博拉病毒核蛋白抗体的制备与双抗夹心ELISA检测方法的建立[J].中国生物工程杂志,2017,37(10):53-59.
作者姓名:刘俊伟  常瑞恒  回鹏  董士尚  王金凤  孙波  杨诚
作者单位:1. 天津国际生物医药联合研究院 天津 300457;2. 南开大学药学院 天津 300071
基金项目:天津市科技计划项目(13ZCZDSY04200,13ZCZDSY03800)资助项目
摘    要:目的:制备抗埃博拉病毒核蛋白(EBOV NP)单克隆抗体和多克隆抗体,建立针对EBOV NP的ELISA检测方法。方法:以重组EBOV NP免疫动物并制备多克隆抗体和单克隆抗体。在此基础上,通过优化抗体浓度、包被液等条件建立检测EBOV NP的双抗夹心ELISA方法。结果:制备出了兔多克隆抗体,筛选出2株可分泌单克隆抗体的鼠源杂交瘤细胞株。Western blot实验结果表明兔多抗与鼠单抗的结合区域均为N端1~35氨基酸。通过优化,建立了针对EBOV NP的双抗夹心ELISA检测方法。其线性范围是31.2~1 000 ng/ml,最低检测限为2.6 ng/ml。结论:制备出了抗EBOV核蛋白的高特异性多克隆抗体和单克隆抗体,建立了定量检测EBOV核蛋白的方法。

关 键 词:埃博拉病毒  抗体  双抗夹心ELISA法  核蛋白  
收稿时间:2017-03-23

Preparation of Anti-ebola Nucleoprotein Antibodies and Establishment of Sandwich ELISA Assay
LIU Jun-wei,CHANG Rui-heng,HUI Peng,DONG Shi-shang,WANG Jin-feng,SUN Bo,YANG Cheng.Preparation of Anti-ebola Nucleoprotein Antibodies and Establishment of Sandwich ELISA Assay[J].China Biotechnology,2017,37(10):53-59.
Authors:LIU Jun-wei  CHANG Rui-heng  HUI Peng  DONG Shi-shang  WANG Jin-feng  SUN Bo  YANG Cheng
Abstract:
Keywords:Nucleoprotein  Sandwich ELISA  Ebola virus  Antibody  
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