柯萨奇B3病毒结构和非结构蛋白基因重组质粒的构建及其在体外真核细胞中的 |
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引用本文: | 王灵枢,朱莉.柯萨奇B3病毒结构和非结构蛋白基因重组质粒的构建及其在体外真核细胞中的[J].微生物学免疫学进展,2000,28(4):19-22. |
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作者姓名: | 王灵枢 朱莉 |
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作者单位: | 上海第二医科大学,上海 |
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摘 要: | 制备CVB3结构蛋白和非结构蛋白重组质粒DNA疫苗时,采用RT-PCR从CVB感染的HeLa细胞中扩增VP1、VP2、2A和3D基因,重组入真核表达质粒pcDNA3中,构建pcDNA3/VP2、pcDNA3/VP1、pcDNA3/2A和pcDNA3/3D重组质粒,经酶切和测下实扩增的序列并将各重组质粒体外转染真核细胞COS-7,用RT-PCR检测mRNA的转录,用Western-blot检测表达产物。结果4种重组质粒酶切出相应大小的目的片段,经测序证实为CVB3相应序列,Western-blot证实能够在体外真核细胞中表达。本文成功构建CVB3结构与非结构蛋白的重组质粒DNA疫苗,为进一步研究其免疫效果奠定了基础。
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关 键 词: | 柯萨奇病毒B3 DNA疫苗 质粒 表达 |
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